[发明专利]抗IL-4Rα的单域抗体以及应用和药物

说明书

本发明公开了一种抗IL‑4Rα的单域抗体以及应用和药物，涉及抗体技术领域。本发明公开的单域抗体其CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.37‑53中的任意一种所示，CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.54‑68中的任意一种所示，CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.69‑85中的任意一种所示。该单域抗体可特异性结合IL‑4Rα，可用于IL‑4Rα相关疾病如自身免疫疾病的预防诊断和/或治疗。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，具体而言，涉及抗IL-4Rα的单域抗体以及应用和药物。

背景技术

IL-4和IL-4Rα是理想的药物治疗靶点，主要用于治疗二型辅助T(Th2)细胞异常相关的人体疾病。人IL-4Rα亚基(Swiss Prot数据库收录号：P24394)是一个分子量为140kDa的I型膜蛋白，和人IL-4的结合具有高亲和力。IL-4/IL-4Rα复合体可以通过IL-4分子上的结构域使IL-4Rα与CD132或IL-13Rα1亚基形成二聚体，从而形成两种不同的信号分子复合物，分别对应I类和II类受体。除此之外，IL-13结合IL-13Rα1后形成的复合物可以募集IL-4Rα亚基，同样可以形成II类受体复合物。所以IL-4Rα可以调节IL-4，IL-13两个分子相关的生物学活性(Gessner等,Immunobiology,201:285,2000)。体外实验研究表明IL-4和IL-13的激活效应对多种细胞都有作用，这些细胞包括：T淋巴细胞，B淋巴细胞，嗜酸性粒细胞，巨细胞，嗜碱性粒细胞，气道平滑肌细胞，肺纤维细胞和内皮细胞。

IL4Rα在不同类型的细胞上表达水平都不高，一般是每个细胞表达100-5000个分子(Lowenthal等,J Immunol,140:456,1988)，例如外周血T细胞，单核细胞，气道上皮细胞，B细胞和肺成纤维细胞。I型受体在造血细胞表面具有表达优势，而II型受体在造血细胞和非造血细胞表面都有表达。

IL-4Rα在人类群体中的多态性已有研究做过讨论(Gessner et al,Immunobiology,201:285,2000)，研究显示在某些群体中该分子的多态性是与IgE水平或临床特应性相关的，例如，V75R576 IL-4Rα与变应性哮喘以及IL-4Rα功能增强有关(Risma等,J.Immunol.169(3)1604-1610,2002)。

许多证据表明，IL-4/IL-13途径在哮喘病理学(有关综述参见Chatila,Trends inMolecular Med,10:493,2004)以及大量罗列于本文它处的其它病症中起着重要作用。目前认为，IL-4和IL-13的分泌增加引发并维持这种疾病过程。IL-13被认为是触发气道高反应性(AHR)、粘液分泌过多以及气道重塑的重要配体，而IL-4则被认为是Th2极化和IgE产生的主要诱发因素(Wynn,Annu Rev Immunol,21:425,2003)。

动物模型的证据进一步支持IL-4Rα在哮喘中的作用。在用卵清蛋白(OVA，一种模型变应原)进行变应原刺激的过程中，IL-4R拮抗剂(IL-4突变体；C118缺失)抑制了OVA敏化引起的功能性鼠体内过敏性气道嗜酸性粒细胞增多以及AHR的发生(Tomkinson等，J.Immunol.166(9):5792-5800,2001)。此外，多项体内研究证实了在哮喘动物模型中阻断IL-13或IL-14的正面作用。例如，在OVA-诱导持续性气道炎症的慢性模型中，治疗剂量的抗IL-13单克隆抗体抑制了AHR、中止了上皮下的纤维化和炎症的进展、并将粘液分泌过多状态恢复到了基础水平(Yang等，J.Pharmacol.Exp.Ther.313(1):8-15,2005)。在小鼠OVA模型中，但在免疫期间给药时，用抗IL-4抗体抑制IL-4显示出使嗜酸性粒细胞浸润的显著降低的效果(Coyle等，Am J Resp Cell Mol Biol，13:54，1995)。在类似模型中，OVA刺激后，IL-4缺陷型小鼠在支气管肺泡灌洗液中的嗜酸性粒细胞明显较少，支气管周围炎症也少得多(Brusselle等，Clin Exp Allergy,24:73，1994)。