[发明专利]骆驼蓬碱在制备防治慢性肾脏病的药物中的应用

说明书

本发明公开了骆驼蓬碱在制备防治慢性肾脏病的药物中的应用。所述的骆驼蓬碱(Harmine)的结构如式(I)所示。本发明通过体内外实验发现，Harmine可减少缺氧引起的脂滴聚集，并且改善脂肪酸代谢障碍缓解肾间质纤维化进程。Harmine可降低肾小管上皮细胞脂肪酸代谢障碍和缓解肾间质纤维化，能应用于制备防治慢性肾脏病的药物。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及骆驼蓬碱在制备防治慢性肾脏病的药物中的应用。

背景技术

慢性肾脏病(Chronic kidney disease，CKD)以其高达10.8％的发病率已经成为威胁人类公共健康的主要疾病之一。肾小管间质纤维化是各种慢性肾脏病(chronickidney disease，CKD)进展至终末期肾脏病的共同病理表现。因此，深入研究肾小管间质纤维化的分子机制对于阻止或延缓慢性肾脏病具有重要意义。

慢性缺氧导致肾小管损伤是肾间质纤维化形成的主要原因及早期事件。持续不断的慢性缺氧可导致肾小管上皮细胞发生不可逆性损伤，发生坏死、凋亡、表型转化，启动肾脏的损伤修复应答，肾间质纤维化是一个失败的损伤修复过程，以肌成纤维细胞的增殖及细胞外基质(Extracelluar matrix，ECM)过度沉积为主要特征。我们课题组长期致力于慢性缺氧性肾损伤的研究，已证实转录因子Twist受HIF-1α直接转录激活，在缺氧导致的肾小管上皮细胞转分化(EMT)和肾脏纤维化中发挥着重要作用，采用Twist1的siRNA可以体外显著减低肾小管上皮细胞纤维化因子的表达。新近的(Nat Med.2015；21(1):37-46)研究报道发现：肾小管上皮细胞主要依赖于脂肪酸的氧化供能，阻止肾小管上皮细胞的脂肪酸氧化供能将导致细胞内脂滴聚集、大量细胞凋亡、表型转化，释放炎症因子、促纤维化因子导致肾间质纤维化。我们研究发现缺氧可以诱导肾小管上皮细胞脂肪酸代谢障碍，因此，急需寻找缓解脂代谢障碍逆转纤维化的有效药物。

骆驼蓬，又名苦苦菜(《陕西中草药》)，骆驼蒿、臭草、臭牡丹、沙蓬豆豆(《陕甘宁青中草药选》)，阿地热斯忙(维名)，乌姆希-乌布斯(蒙名)，臭古都、老哇瓜。该植物种子提取物Harmine的结构如下式(I)所示：

发明内容

本发明的目的是提供骆驼蓬碱或其药用盐在制备防治慢性肾脏病的药物中的应用，优选，是提供骆驼蓬碱或其药用盐在制备改善肾小管上皮细胞脂肪酸代谢障碍和减轻肾间质纤维化的药物中的应用。所述的骆驼蓬碱(Harmine)的结构式如下式(I)所示：

所述的骆驼蓬碱(Harmine)购买于Sigma-Aldrich(286044-1G)(美国)。

本发明还提供了一种防治慢性肾脏病的药物，其含有有效量的骆驼蓬碱或其药用盐为活性成分。

本发明采用40μmol/L Harmine处理缺氧诱导的肾小管上皮细胞系(HK-2)，结果表明，Harmine可以改善慢性缺氧诱导的脂肪酸代谢障碍。

进一步，采用Harmine处理HK-2，缺氧处理48h之后Western blot检测纤维化因子的表达和脂肪酸代谢调控分子的表达，结果显示采用Twist1siRNA和Harmine处理HK-2细胞之后，均可以显著降低纤维化因子α-SMA，胶原(Collagen I，Collagen IV)，Fibronectin的表达，并且对于缺氧条件诱导的HK-2中脂肪酸相关蛋白PGC-1α和PPARα以及脂肪酸氧化关键限速酶CPT1A和ACOX1的下降有显著的缓解作用。

使用C57小鼠构建经典的肾间质纤维化模型---小鼠单侧输尿管梗阻(Unilateralureteral obstruction,UUO)模型，采用HE和Masson染色检测Harmine处理对肾脏病理改变和纤维化程度的改变，结果显示，Harmine可以显著缓解肾脏病理学改变和纤维化的程度。