[发明专利]聚山梨酯类化合物的快速检测方法和系统

说明书

本发明提供了采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对聚山梨酯类化合物的快速检测方法和系统，该方法包括步骤一、使用标准化前处理方法对样品进行前处理并制备靶板；步骤二、使用MALDI质谱仪采集数据，从而获得聚山梨酯类化合物质谱图；步骤三、将步骤二获得的数据导入“聚山梨酯类化合物成分数据库”；步骤四、数据库比对，实现主成分、杂质成分的快速鉴定。该方法能够实现快速、准确鉴定聚山梨酯类化合物的主成分及杂质成分；快速鉴别聚山梨酯类化合物的种类。

技术领域

本申请涉及聚山梨酯类化合物的快速检测方法和系统，具体的，涉及采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对聚山梨酯类化合物的快速检测方法和系统。

背景技术

聚山梨酯(polysorbate)，又名吐温(Tween)，是脱水山梨醇与环氧乙烷加成聚合后，和不同脂肪酸酯化后形成的聚合物。根据脂肪酸碳链长度的不同，吐温可分为20(单月桂酸酯)，40(单棕榈酸酯)，60(单硬脂酸酯)及80(单油酸酯)等。聚山梨酯为非离子型表面活性剂，在医药、食品及化妆品行业中广泛用作乳化剂、增溶剂及分散/助悬剂等。例如，2015年《中国药典》四部收录了吐温20、40、60及80为药用辅料。

聚山梨酯通常为混合物，杂质成分复杂。研究表明，在临床的应用中，聚山梨酯中的杂质会引发一些副作用和不良反应，如过敏、溶血等。美国，欧洲，日本及中国《药典》对其主要成分的鉴定大多采用红外、比色、沉淀析出或水解后测脂肪酸组成等方法，这些方法缺乏特异性，且费时费力。

也有现有技术CN201110051368采用了高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术对吐温80中的异山梨醇聚氧乙烯、一失水山梨醇聚氧乙烯一油酸酯、异山梨醇聚氧乙烯一油酸酯等化合物进行鉴定。CN201811634778采用了高效液相色谱-高分辨质谱联用(HPLC-HRMS)分析方法分析，实现对吐温系列辅料中化合物的准确鉴定，获得每种化合物的结构类型和聚合度信息。然而，上述方法基于保留时间与精确分子量之间的依数性关系，检测速度慢，操作流程长，并且一旦成分复杂或杂质较多，就需要重新摸索洗脱条件，难以实现快速的鉴定和分析目的。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是一种软电离方式，以单电荷电离为主，适合聚合物等大分子的离子化，且具有分析质量范围宽、数据精确、通量高、速度快等优势。

张琪等(张琪，王爱法，王瑾，张雅军，冯玉飞，范欣戎，肖新月，李晓东，药物分析杂志ChinJPharmAnal2017,37(1):117-124)公开了使用MALDI-TOF-MS可以快速获得聚山梨酯的质谱图，其谱图中包含了主成分和杂质成分的信息。但现有研究仍然存在如下的问题：

1)目前大多的现有技术虽然提出了技术上获得质谱图的可行性，但并没有对质谱图中的各种信息进行详细解析，也就是说，不同的论文虽然给出了一些图谱，但对于图谱内容本身信息并不够充分，实际应用价值没有充分利用。

2)现有技术给出的质谱图的采集条件尚未标准化，对质谱图采集是否可重复也没有进行验证，因此，未能建立重复性高的标准化检测方法，因此现有技术的实际应用的可靠性并不理想。

这些问题的存在导致该技术无法真正实现对聚山梨酯类化合物的具体成分进行可靠的、重复性高的鉴定。

发明内容

本发明解决了这些问题，提出了一套分析系统，该系统包含质谱仪器、配套数据库及样品制备的标准化流程，使用该系统可真正实现快速对聚山梨酯类化合物的主成分及杂质成分的定性鉴定和半定量分析。

本发明最主要的优点在于对检测流程进行了标准化的优化(例如建立了标准化的前处理方法)，并且引入了标准化处理的数据库，该数据基于现有的检测数据并进行了相应的标准化校正。因此，大大的提高了检测的可靠性。