[发明专利]一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法

权利要求书

1.一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

S1:打开发酵机顶部的密封塞，于顶部入口处添加玉米粉、小麦粉、酵母膏、中蜂蜜、蛋白胨的混合物，然后再加入惰性气体，排出发酵机内部的氧气，然后再将盛放有中间气单孢菌的惰性气体罐上的加料管与发酵机的加料口连接，使得中间气单孢菌进入发酵机的内部，最后加入适量的去离子水，去离子水中富含Ca²⁺，发酵时长为2-3d，温度为15-25℃；

S2:发酵完后进行发酵液的取用时，先拔出密封塞，将经过杀菌消毒后的注射针管从发酵机的加料口插入，此时调节驱动橡胶圆环使得橡胶筒的底部上移，通过环形可视窗观察发酵机内部液面情况，当注射针管能与发酵机内部发酵液接触时，用注射针管吸出菌落，塞上密封塞；

S3:将吸出的菌落诱导细胞在离心机中离心，取上清液将丝蛋白分离得到粗酶液；

S4:将S3所得的粗酶液中加入硫酸铵，再将粗酶液和硫酸铵的混合液冰浴搅拌，充分沉淀后，收集沉淀物；

S5:将沉淀物经硫酸缓冲液及凝胶柱处理层析分离，进行活性测定后收集活性部分，然后再经过脱盐、浓缩即可得低温淀粉酶成品；

其中S1中所述的发酵机包括发酵箱(1)、橡胶筒(2)、密封盖(3)、驱动橡胶圆环(10)和从动橡胶圆环(25)；所述发酵箱(1)的顶部设有密封盖(3)；所述密封盖(3)的中心位置处开设有加料口(12)；所述加料口(12)的内部设有橡胶膜片(11)；所述橡胶膜片(11)的边缘与加料口(12)的内壁固连；所述橡胶膜片(11)上设有开口；所述加料口(12)的内部位于橡胶膜片(11)的上方插设有密封塞(7)；所述密封盖(3)的底部边缘开设有第一环形凹槽(24)；所述第一环形凹槽(24)的断面为圆弧形结构；所述第一环形凹槽(24)的内部设有从动橡胶圆环(25)；所述第一环形凹槽(24)的内壁固定设有用于支撑从动橡胶圆环(25)的弧形支撑杆(23)；所述弧形支撑杆(23)设有若干组，若干组弧形支撑杆(23)在第一环形凹槽(24)的内壁均匀排列；所述第一环形凹槽(24)的内壁和弧形支撑杆(23)的内壁均固定设有弹性伸缩杆(26)；所述弹性伸缩杆(26)的自由端压紧在从动橡胶圆环(25)的边缘，且弹性伸缩杆(26)的自由端设有滚珠；所述发酵箱(1)的内部设有橡胶筒(2)；所述橡胶筒(2)为底部为弧形结构的圆柱筒；所述橡胶筒(2)的顶端穿过密封盖(3)底部的第二环形凹槽(20)并固定连接在从动橡胶圆环(25)的边缘；所述第二环形凹槽(20)与第一环形凹槽(24)连通；所述密封盖(3)的顶部位于第一环形凹槽(24)的正上方设有若干组回形限位板(8)；所述回形限位板(8)的内部穿设有驱动橡胶圆环(10)；所述驱动橡胶圆环(10)的内部和从动橡胶圆环(25)的内部均固定设有磁铁组(9)；所述磁铁组(9)中的磁铁绕驱动橡胶圆环(10)和从动橡胶圆环(25)断面的中心点呈等距环形排列，且所述磁铁组(9)上相邻两组磁铁的内侧端的极性相反；所述磁铁组(9)在驱动橡胶圆环(10)上的排布方式与磁铁组(9)在从动橡胶圆环(25)上的排布方式相同；所述驱动橡胶圆环(10)的断面直径大于从动橡胶圆环(25)的断面直径；所述密封盖(3)上位于加料口(12)的外边缘设有环形可视窗。

2.根据权利要求1所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，其特征在于：所述密封盖(3)上位于环形可视窗和第二环形凹槽(20)之间设有环形通槽(13)；所述环形通槽(13)的内部插设有环形板(6)；所述环形通槽(13)的内壁粘设有环形橡胶垫；所述环形板(6)上设有的环形凸起位于环形橡胶垫内壁的环形滑轨内；所述环形板(6)的顶端伸出环形通槽(13)的上端口；所述环形板(6)的底端通过压缩弹簧与扇形刮板(14)的内侧壁固连；所述压缩弹簧将扇形刮板(14)压紧在橡胶筒(2)的内壁；所述扇形刮板(14)设有若干组，若干组扇形刮板(14)之间通过橡胶刮板(33)固连；所述扇形刮板(14)的顶端通过铰支座活动铰接在密封盖(3)的底部。

3.根据权利要求1所述的一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶的生产方法，其特征在于：所述发酵箱(1)的顶部边缘开设有收集槽(4)；位于所述从动橡胶圆环(25)下方的弹性伸缩杆(26)的活动杆部分固定设有刮料板(22)。