[发明专利]一种PTEN-Long多克隆抗体及其制备方法和用途有效

专利信息
申请号: 202010530721.9 申请日: 2020-06-11
公开(公告)号: CN111763260B 公开(公告)日: 2022-03-29
发明(设计)人: 艾建忠;郑筱男;徐航;曹德宏;易贤彦翎 申请(专利权)人: 四川大学华西医院
主分类号: C07K16/40 分类号: C07K16/40;C07K16/06;C07K1/22;C12N9/16;G01N33/574;G01N33/573;A61K39/395;A61P35/00;A61P3/00;A61P25/00;A61P9/00
代理公司: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人: 李高峡;张娟
地址: 610000 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 pten long 克隆 抗体 及其 制备 方法 用途
【权利要求书】:

1.一种蛋白,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种制备PTEN-Long抗体的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:

1)制备氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白抗原;

2)接种免疫原;

3)采血;

4)分离纯化,即可。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤2)中,接种免疫原的对象为兔;和/或每只兔子接种的免疫原的剂量为:400~600μg/次接种4~5次。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述接种免疫原的对象为日本大耳白兔,和/或每只兔接种的免疫原剂量为,500μg/次,接种4~5次。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:接种免疫原时,加入佐剂。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,首次接种免疫原时,使用完全弗氏佐剂,之后每次免疫所用佐剂为不完全弗氏佐剂。

7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤4)中,所述分离纯化的方法包括:

Protein A亲和纯化、HABP亲和纯化及抗原亲和纯化;

其中,Protein A亲和纯化为:

取Protein A亲和柱,上样,用平衡缓冲液进行淋洗,再用洗脱液洗脱,收集洗脱峰,其中,平衡缓冲液为包含浓度为50mM的Tris以及浓度为100mM的NaCl的溶液,洗脱液为包含浓度为100mM的Glycin以及浓度为10mM的NaCl的溶液;

HABP亲和纯化为:取HABP亲和柱,上样,用平衡缓冲液淋洗,收集流穿液,其中,平衡缓冲液为包含浓度为50mM的Tris以及浓度为100mM的NaCl的溶液;

抗原亲和纯化为:取抗原亲和层析,上样,用平衡缓冲液淋洗再用洗脱液洗脱,收集洗脱峰,其中,平衡缓冲液为包含浓度为50mM的Tris以及浓度为100mM的NaCl的溶液,洗脱液为包含浓度为100mM的Glycin以及浓度为10mM的NaCl的溶液。

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