[发明专利]一种两亲性纳米载药微乳及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种两亲性纳米载药微乳及其制备方法和应用，以天然多糖羧甲基壳聚糖为亲水性多糖骨架，通过EDC介导反应使共轭亚油酸疏水修饰羧甲基壳聚糖，得到共轭亚油酸‑羧甲基壳聚糖多聚物，然后利用活性酯法将L‑精氨酸连接到共轭亚油酸‑羧甲基壳聚糖多聚物中糖骨架的羧基上，得到两亲性壳聚糖耦合物，最后将两亲性壳聚糖耦合物经过超声乳化法自组装成尺寸均一的两亲性纳米载药微乳。本发明的纳米载药微乳可以在保证胰岛素分散良好、稳定性佳的前提下实现透皮递送，从而提高患者的接受度，减少给药量和毒副作用。

技术领域

本发明涉及纳米材料技术领域，具体涉及一种两亲性纳米载药微乳及其制备方法和应用。

背景技术

壳聚糖（CS）是一种天然多糖，是甲壳素脱乙酰化的产物，是由氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖结构单元组成的直链多糖。壳聚糖是一种新型的天然高分子材料，由于分子内部含有羟基、氨基和糖苷键等多种活性官能团，使其在环境、生物医药、工业和农业等领域有着广泛的应用。

羧甲基壳聚糖是一种带负电荷的水溶性壳聚糖衍生物，可以克服CS的应用限制，扩大药物吸收部位，其优势主要体现在优良的水溶性和生物相容性。但是因难于制备出球型规则、粒径均一、包载效果好、透皮性能优良的微粒，致使其作为纳米载药微乳的研究较为少见。

胰岛素（Ins）是I型糖尿病最常用的基本药物之一。目前胰岛素的给药方法主要为皮下注射，非注射剂型主要包括口服给药、鼻腔给药、口腔薪膜给药、直肠给药、透皮给药以及综合方式给药等，或多或少地存在用药量大、毒副作用大、靶向性差、生物利用率低、患者顺应性差等缺点。而最佳的胰岛素给药方式应当满足更加方便、快捷，安全性高，更好地患者顺应性，可以预定速度释放、可在病灶部位富集等条件。

纳米载药微乳通过化学键合或者物理吸附的方式结合药物，使之分散于纳米微粒的内部或者表面。药物通过扩散作用释放，也可通过载体基质本身逐渐溶蚀降解释放，可以延缓药物释放，延长药物作用时间。而包裹在微粒内部的药物可有效避免提前降解，可提高药物的稳定性、降低用药量和用药成本。此外，纳米载药微乳在生物体内可利用尺寸效应实现被动靶向运输，例如粒径在100-1000nm的微球很快被网状内皮系统(RES)的吞噬细胞从血液中清除，到达网状内皮组织丰富的肝、脾组织中，而粒径小于100nm的纳米微粒可到达骨髓等组织中。但是Ins是一种大分子蛋白，使用有机溶剂、发热、长时间超声及强烈搅拌会降低其活性，故纳米微粒虽然是良好的胰岛素候选载具，却不易制备成分散良好、稳定性佳、适合透皮运送的载药微乳。

发明内容

本发明的目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种两亲性纳米载药微乳及其制备方法和应用，该纳米载药微乳可以在保证胰岛素分散良好、稳定性佳的前提下实现透皮递送，从而提高患者的接受度，减少给药量和毒副作用。

本发明为解决上述技术问题的不足，所采用的技术方案是：一种两亲性纳米载药微乳的制备方法，以天然多糖羧甲基壳聚糖为亲水性糖骨架，通过EDC介导反应使共轭亚油酸疏水修饰羧甲基壳聚糖，得到共轭亚油酸-羧甲基壳聚糖多聚物，然后利用活性酯法将L-精氨酸连接到共轭亚油酸-羧甲基壳聚糖多聚物中糖骨架的羧基上，得到两亲性壳聚糖耦合物，最后将两亲性壳聚糖耦合物经过超声乳化法自组装成尺寸均一的两亲性纳米载药微乳。

作为本发明一种两亲性纳米载药微乳的制备方法的进一步优化：所述介导反应的具体方法为：将含有共轭亚油酸的甲醇以及溶解EDC的甲醇倒入溶解有羧甲基壳聚糖的水溶液中，持续搅拌反应，反应结束后经离心、洗涤、干燥和研磨，制得共轭亚油酸-羧甲基壳聚糖多聚物。

作为本发明一种两亲性纳米载药微乳的制备方法的进一步优化：所述离心和洗涤的具体方法为：在5000r/30min的条件下至少离心两次，每次均以甲醇为溶剂洗涤，最后一次以乙醚洗涤，得到沉淀。