[发明专利]一种普罗布考的质量控制方法

说明书

本发明属于药物分析技术领域。本发明公开了普罗布考原料药及制剂中杂质高效液相色谱分离测定方法及应用，用于同时分离杂质（2,2'，6,6'‑四叔丁基二苯醌）、杂质B（4,4'‑二硫代双（2,6‑二叔丁基苯酚）、杂质C（（4‑[（3,5‑二叔丁基‑2‑羟基苯硫基）异丙基亚硫醇]‑2,6‑二叔丁基苯酚）。本方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，配制对照品和供试品溶液，注入液相色谱仪，以一定比例的有机相和缓冲盐溶液作为流动相，可保证将原料药和相关制剂中的原料药及制剂中普罗布考、杂质A、杂质B、杂质C完全分开。本方法分析时间短，为普罗布考原料药及相关制剂的研发和生产提供了有效的质量控制方法，具有推广价值。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种普罗布考的质量控制方法。

背景技术

高胆固醇血症（Hypercholesterolemia）为常见代谢性疾病，临床检查数据表明，患者血液中甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）浓度升高，高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）浓度降低，是冠心病（coronary heart disease，CHD）、缺血性脑卒中以及下肢血管病等动脉粥样硬化性疾病的独立危险因素之一。

普罗布考（probucol），化学名称为4,4'-[(1-甲基乙基)二硫]双[(2,6-二叔丁基)苯酚]，分子式为C31H48O2S，分子量为516.84，CAS号为23288-49-5。

普罗布考适应症为高胆固醇血症，由于具有种降脂、抗氧化的药理作用，普罗布考临床被广泛用于降低胆固醇和治疗动脉粥样硬化。1977年首先在美国上市，1996年在我国研制生产成功并投入临床应用，是近年来具有发展前途的新型抗动脉粥样硬化药物。

中国药典(CP)、美国药典(ESP) 以及日本药典(JP) 分别收载了普罗布考原料药及相关制剂的质量标准。中国药典(CP)具体收载了普罗布考原料药及片剂，对于所含杂质，并未说明具体成分，仅采用正向色谱法以自身对照法限定各杂质峰面积的和不得大于主峰面积的1.0%。

目前，已知的普罗布考相关物质有三种，分别为杂质A（2,2'，6,6'-四叔丁基二苯醌）、杂质B（4,4'-二硫代双（2,6-二叔丁基苯酚）、杂质C（（4-[（3,5-二叔丁基-2-羟基苯硫基）异丙基亚硫醇]-2,6-二叔丁基苯酚）。

方树青等公开了一种普罗布考有关物质的检测方法，采用的HPLC法并没有公布具体的色谱条件，实验结果显示并不能更直接检测3种有关物质，也不能分别检测A、B、C的具体含量，只能限制有关物质总量。

安珍珍等公开了一种RP-HPLC 法同时测定普罗布考片中 3 种有关物质的含量的方法，回收率在80-120%之间，检测方法总时长达到70min，定量限及检测线均较高，不利于该方法的推广。

有关物质是影响药品安全性的重要控制指标之一，开发一种灵敏度高、检测时间短、适合工业生产应用的普罗布考原料药及其制剂有关物质的检测方法，对药品质量控制具有非常重要的意义。

发明内容

本发明根据现有技术的不足，提供一种使普罗布考与其有关物质有效分离的检测方法，具体是提供一种有效缩短检测时间以控制产品质量、降低检测成本、适用于普罗布考原料药及其制剂的高效液相色谱分离测定方法。

本发明的目的之一是提供一种普罗布考原料药及其制剂中有关杂质的高效液相色谱分离测定方法，用于同时分离杂质A、杂质B、杂质C中，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，配制对照品和供试品溶液，以甲醇-乙腈的混合溶液为流动相A，以PH为4.0~5.0的缓冲溶液为流动相B，A与B的体积比为(90:10)～(50:50)，梯度洗脱