[发明专利]一种高准确性尿液中NGAL检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种高准确性尿液中NGAL检测试剂盒，属于NGAL检测技术领域。该试剂盒包括试剂1和试剂2，试剂1为反应缓冲液，试剂2为NGAL抗体致敏胶乳溶液，试剂1与试剂2的混合物中含有人白蛋白和人IgG。本发明通过人白蛋白和人IgG的添加可避免尿液样本中不同浓度人白蛋白和人IgG对于NGAL检测结果的干扰，进而提高尿液中NGAL检测的准确性；此外，结合试剂2的增敏处理，可在提高准确性的同时保证检测的高灵敏度。

技术领域

本发明涉及NGAL检测技术领域，更具体的说是涉及一种高准确性尿液中NGAL检测试剂盒。

背景技术

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是急性肾损伤AKI的最理想标志物之一；丹麦Bioporto公司发现并生产了Elisa和胶乳免疫比浊法的试剂对NGAL进行检测，目前世界上绝大部分的NGAL研究均以Bioporto公司的试剂为研究基础。Bioporto公司授权雅培Abott公司使用其原料开发了化学发光法的NGAL检测试剂，并在中国NMPA获得注册证。

尿液中NGAL的测定因其无创性已成为目前NGAL测定的主要方式；目前国内存在大量的NGAL检测试剂盒以及相关专利称其可解决NGAL测定过程中灵敏度、线性范围、试剂稳定性、准确度等一系列问题，然而其均未能有效解决临床使用中最关键的问题-临床样本测定准确性，即临床样本检测结果与Bioporto一致性问题(相关性良好，绝对数值接近)。

例如，CN201711132885.0中记载，以聚乙二醇六氨为封闭剂可改善胶乳免疫比浊法检测试剂的灵敏度、特异性以及抗体结合胶乳颗粒的稳定性，能够和Bioporto Elisa试剂达到相关系数(R²)0.9334的相关性，相较于其他国内试剂取得了很大进步。然而，此相关系数仍然偏低，通常相关系数要达到0.95以上才能称为相关性良好；并且，JW试剂和Bioporto绝对数值还有40％左右的偏差。

因此，目前临床急需成本合理，准确性高，即测定尿液NGAL临床样本时，能够和Bioporto或雅培NGAL试剂检测相关性良好，相关系数大于0.95，绝对数值接近(相对偏差15％以内)的试剂盒。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种高准确性尿液中NGAL检测试剂盒。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种高准确性尿液中NGAL检测试剂盒，包括试剂1和试剂2，试剂1为反应缓冲液，试剂2为NGAL抗体致敏胶乳溶液，试剂1与试剂2的混合物中含有人白蛋白和人IgG。

在NGAL检测试剂中，添加人白蛋白和人IgG，可使尿液样本加入试剂反应体系后的人白蛋白和人IgG浓度位于对NGAL测定抑制程度不明显的浓度区域，进而显著改善尿液NGAL测定的准确性。

优选地，试剂1与试剂2的混合物中，人白蛋白终浓度不低于10000/x mg/L，人IgG终浓度不低于2000/x mg/L；其中x为待检测样品在试剂1与试剂2的混合物中的稀释倍数。

优选地，人白蛋白添加于试剂2中，人IgG添加于试剂1中。

优选地，试剂1中除人IgG外，还包括：试剂1缓冲液，电解质，表面活性剂，防腐剂，促凝剂和阻断剂。

优选地，试剂1中除人IgG外，还包括：pH6.8-7.5的100mM Hepes-NaOH背景缓冲溶液，氯化钠23.38-116.88g/L，吐温-205-20mL/L，proclin-300防腐剂0.35mL/L，聚乙二醇60005-15g/L，Scantibody HBR-26阻断剂或菲鹏生物E-015阻断剂2-2.5mL/L。

优选地，试剂2中除人白蛋白外，还包括：试剂2缓冲液，胶乳颗粒，抗体，表面活性剂，防腐剂和封闭剂。