[发明专利]超高效液相色谱串联质谱检测血浆中抗动脉粥样硬化药物的试剂盒

说明书

本发明公开了一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中抗动脉粥样硬化药物的试剂盒，属于血浆检测技术领域。针对常用的抗动脉粥样硬化药物，阿托伐他汀、邻羟基阿托伐他汀、对羟基阿托伐他汀、瑞舒伐他汀和地高辛，本发明的试剂盒采用LC‑MS/MS法，可以一次性对其进行检测，目标药物与代谢产物同时监测，灵敏度高、准确性好，可很好应用于临床，为血浆抗动脉粥样硬化药物联合用药研究提供可靠依据。

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种利用超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中抗动脉粥样硬化药物的试剂盒。

背景技术

根据中国心血管疾病报告报告，心血管疾病(CVD)是中国居民疾病死亡的主要原因。高血压和高脂血症通常并存，是心血管疾病进展和发展的基础。高脂血症是动脉粥样硬化进展的主要危险因素，动脉粥样硬化又会导致一些心血管并发症，如冠心病、缺血性脑血管疾病、外周血管疾病、缺血性脑血管疾病和外周血管疾病。高脂血症是指包括脂肪、脂肪酸、胆固醇、胆固醇酯、磷脂和甘油三酸酯在内的脂质在血液中的升高，控制高脂血症对于预防动脉粥样硬化及其相关疾病很重要。

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG–CoA)还原酶抑制剂，也就是他汀类药物，是最有效、耐受性最好、应用最广泛的降脂药物，被认为是高脂血症的一线治疗药物。其中，阿托伐他汀(ATO)是有效的3-羟基-3-甲基戊二烯基(HMG)-CoA还原酶的合成抑制剂，可降低总胆固醇和血浆甘油三酸酯；而对羟基阿托伐他汀(p-HATT)和邻羟基阿托伐他汀(o-HATT)是阿托伐他汀在体内经过肝药酶代谢，得到的两种活性代谢产物。这三种他汀类药物是目前最常用的降胆固醇药物，由于其高疗效和安全性，已在许多国家广泛用于治疗高脂血症。在全球范围内，阿托伐他汀(ATV)钙(纽约辉瑞制药公司的)是最畅销的处方药。

在他汀类药物中，瑞舒伐他汀(ROS)为新型降血脂药，于2003年8月在美国批准用于治疗血脂异常，广泛应用于治疗高胆固醇血症和预防冠状动脉疾病。由于其独特的特性，例如选择性摄入肝细胞、优异的结合亲和力和在酶活性位点的紧密结合相互作用，它对胆固醇和甘油三酯的降低作用最大，是最有效和有效的他汀类药物之一。

然而，相当一部分接受他汀类药物治疗的患者未能达到目标。造成这种失败的原因包括患者依从性差、药物反应的变异性以及他汀类药物剂量方面问题。由于他汀类药物单一疗法的局限性，所以会联合地高辛联合治疗，进一步降低血脂水平。地高辛是一种广泛用于治疗充血性心力衰竭的强心苷，其药用用途1785年被Withering首次提出，但是其治疗范围较窄(0.8-2.0ng/mL)，增加了地高辛使用的复杂性，因此，地高辛药代动力学的微小变化可能导致治疗效果下降或潜在的严重毒性。

目前现有技术已经有针对血浆抗动脉粥样硬化药物体内浓度检测的报道，比如中国专利CN107102079A公开了一种检测人血浆中阿托伐他汀及代谢物的液相色谱-串联质谱方法及临床药学研究应用，可以同时检测3种药物，样本量需要100μL，且需要氮吹浓缩，前处理复杂；此外还有文献报告针对其中一种或几种他汀类药物进行检测，但是效率相对比较低，存在单个样品分析时间长、灵敏度低、线性范围不适宜、样品前处理复杂和进样量大，基质效应干扰等不足。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明提供了一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中抗动脉粥样硬化药物的试剂盒及其应用。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种检测血浆中抗动脉粥样硬化药物的试剂盒，包括：液相色谱流动相、校准品溶液、混合内标溶液、质控品和蛋白质沉淀剂；

所述抗动脉粥样硬化药物包括阿托伐他汀、邻羟基阿托伐他汀、对羟基阿托伐他汀、瑞舒伐他汀和地高辛；

所述液相色谱流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为甲酸-甲酸铵水溶液，流动相B为乙腈；