[发明专利]一种制备血清中定值梅毒特异性抗体的方法

权利要求书

1.一种梅毒特异性抗体免疫亲和柱的配基，其特征在于，由梅毒螺旋体TP47、TP15、TP17蛋白融合而成。

2.根据权利要求1所述的配基，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.一种梅毒特异性抗体免疫亲和柱，其特征在于，所述免疫亲和柱的亲和层析填料偶联有权利要求1或2所述的带有亲和标签的配基。

4.根据权利要求3所述的免疫亲和柱，其特征在于，所述亲和标签为GST标签、His标签、生物素标签或Flag标签。

5.根据权利要求3所述的免疫亲和柱，其特征在于，所述亲和层析填料为CNBr/NHS/环氧/巯基活化琼脂糖或葡聚糖凝胶。

6.权利要求3-5所述梅毒特异性抗体免疫亲和柱的制备方法，其特征在于，先将亲和层析填料活化，然后与权利要求1或2所述的带有亲和标签的配基偶联，之后封闭得到梅毒特异性抗体免疫亲和柱。

7.一种制备血清中定值梅毒特异性抗体的方法，其特征在于，先将梅毒阳性血清进行辛酸沉淀，收集上清，然后利用权利要求3-5所述梅毒特异性抗体免疫亲和柱进行梅毒特异性抗体免疫亲和柱进行免疫亲和层析。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述梅毒阳性血清为人梅毒抗体阳性血清、羊梅毒抗体阳性血清或兔梅毒抗体阳性血清中至少一种。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述辛酸沉淀具体包括以下步骤：

1)将梅毒阳性血清经冷冻离心收集上清，得到组分a；

2)组分a添加pH4.4醋酸钠至浓度为10-25mg/ml，得到组分b；

3)组分b加入辛酸至3-30μl/ml，离心收集上清。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述免疫亲和层析具体为经辛酸沉淀后的上清用权利要求3-5所述梅毒特异性抗体免疫亲和柱进行纯化，收集洗脱液，调节pH至中性；

其中，所述洗脱液为0.2M甘氨酸、0.15MNaClpH2.3-3.0。