[发明专利]一种亚临界水提取和分离灵芝三萜提取物的方法

权利要求书

1.一种亚临界水提取和分离灵芝三萜提取物的方法，其特征在于：灵芝三萜提取物是由以下步骤提取分离得到的：

1.1 将灵芝子实体粉碎，得到灵芝颗粒；

1.2 将1.1灵芝颗粒，加水，在第一恒定的亚临界压力和温度下提取，过滤，加水冲洗，合并得到滤液Ⅰ；滤液Ⅰ经浓缩，乙醇醇沉，离心，上清液浓缩干燥后得到灵芝三萜酸性部位，所述的灵芝三萜酸性部位有12种，分别为：灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C、灵芝酸C2、灵芝酸D、灵芝酸F、灵芝酸G、灵芝酸H、灵芝酸LM2、灵芝烯酸B、灵芝烯酸D、赤芝酸A，其中所述的灵芝颗粒与提取时的水的重量比为1:10，所述的第一恒定的亚临界压力和温度的压力为5MPa，温度为170～190℃，提取时间10 min，灵芝颗粒与冲洗时的水的重量比为1:10，滤液Ⅰ经浓缩后相对密度25℃时为1.00～1.10，乙醇浓度为95%，醇沉终浓度为70%，离心时分离因数6000～8000，上清液的浊度为100 NTU以下；

1.3 将1.2提取后的灵芝颗粒，加水，在第二恒定的亚临界压力和温度下提取，过滤，加水冲洗，合并得到滤液Ⅱ；滤液Ⅱ经浓缩，乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层浓缩干燥后得到灵芝三萜中性部位，所述的第二恒定的亚临界压力和温度高于第一恒定的亚临界压力和温度，其中所述的灵芝颗粒与提取时的水的重量比为1:10，所述的第二恒定的亚临界压力和温度的压力为8Mpa，温度为240～260℃，提取时间10min，灵芝颗粒与冲洗时的水的重量比为1:10，滤液Ⅱ经浓缩后相对密度25 ℃时为1.10～1.20，浓缩液与乙酸乙酯体积比为1:1，萃取次数3次。

2.根据权利要求1所述的一种亚临界水提取和分离灵芝三萜提取物的方法，其特征在于：步骤1.1中所述的灵芝颗粒粒度为40～60目。

3.根据权利要求1所述的一种亚临界水提取和分离灵芝三萜提取物的方法，其特征在于：

步骤1.2中所得的灵芝三萜酸性部位含量达到25%以上，DPPH清除率可达到88.38%。

4.根据权利要求1所述的一种亚临界水提取和分离灵芝三萜提取物的方法，其特征在于：步骤1.3中所得的灵芝三萜中性部位物质含量达到14%以上，对人大细胞肺癌细胞H460的半抑制率IC₅₀为95.0μg/ml，对人肝癌细胞HepG2的半抑制率IC₅₀为77.7μg/ml。