[发明专利]一种完全型先天性静止性夜盲果蝇模型的构建方法及应用

权利要求书

1.Mtt基因在促进果蝇模拟表现CSNB中的应用，其特征在于，所述mtt基因包含p.R217Q突变氨基酸的片段为：

180 VTSIQVANLLRLFRIPQVSYFSTSPELSNKQRFEYFSRTIPSDHYQVKAMVEIVKRMGWS 238。

2.Mtt基因在构建CSNB果蝇模型中的应用，其特征在于，所述mtt基因包含p.R217Q突变氨基酸的片段为：

180 VTSIQVANLLRLFRIPQVSYFSTSPELSNKQRFEYFSRTIPSDHYQVKAMVEIVKRMGWS 238。

3.一种CSNB果蝇模型的构建方法，其特征在于，包括：

构建一对CRISPR/Cas9基因编辑靶点：靶点1和靶点2，

所述靶点1序列为：5’-GAGTGATCCGAGGGAATAGTG-3’；

所述靶点2序列为：5’-GCTCGGATCACTACCAGGTGA-3’；

（2）制备分别包含有所述靶点1、靶点2的两个重组质粒，以及供体DNA质粒；

（3）将两个所述重组质粒和所述供体DNA质粒注入到表达Cas9蛋白的果蝇胚胎中，胚胎培育成虫后，获得F0代果蝇；

（4）将F0代果蝇与平衡系进行杂交，从后代中获得CSNB果蝇。

4.根据权利要求3所述的一种CSNB果蝇模型的构建方法，其特征在于，构建所述供体DNA

质粒包含一组引物，包括：

5’同源臂引物：

mtt-5arm-f：5’-AGCACTTACGCAGAAGCTGT-3’；

mtt-5arm-r：5’-ATGGTCGCTCGGGATGGTCTGCGAGAAGTACTCGAATCGCTG-3’；

3’同源臂引物：

mtt-3arm-f：5’-GCAGACCATCCCGAGCGACCATTACCAGGTGAAGGCCATGGT-3’；

mtt-3arm-r：5’-CCAGTTCCTCGAAAGCctga-3’。

5.根据权利要求3所述的一种CSNB果蝇模型的构建方法，其特征在于，所述步骤（4）中使

用一组鉴定引物来获得所述CSNB果蝇，所述鉴定引物包括：

mtt-KI-f：5’-CTGTCTTGCCATGAGCATTTGAC-3’；

mtt-KI-r：5’-ATGGTCGCTCGGGATGGTCTGC-3’。

6.一种如权利要求3~5任一所述构建方法获得的CSNB果蝇模型。

7.根据权利要求6所述的一种CSNB果蝇模型，其特征在于，所述CSNB果蝇模型表型为复眼

发生异常、感光能力下降。

8.一种如权利要求7所述的CSNB果蝇模型在药物筛选中的应用。

9.根据权利要求8所述的一种CSNB果蝇模型在药物筛选中的应用，其特征在于，所述药物

为治疗人类CSNB疾病的药物。