[发明专利]一种负载microRNA组织工程支架及其制备方法

权利要求书

1.一种负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将湿态凝胶材料加入带有针头的打印料筒中，预热，然后进行3D打印处理，得到3D打印产物；将所述3D打印产物浸泡在交联剂中进行交联凝胶，得到湿态凝胶三维多孔支架；

（2）将步骤（1）所述湿态凝胶三维多孔支架冷冻干燥，得到脱水后的支架；

（3）将步骤（2）所述脱水后的支架灭菌处理，然后在无菌环境下将microRNA溶液滴加在灭菌后的支架上，静置，得到所述负载microRNA组织工程支架。

2.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述湿态凝胶材料为明胶、海藻酸钠、壳聚糖、透明质酸、脱细胞胶原、GelMA、纤维素中的一种以上。

3.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述预热的温度为25-45℃。

4.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述打印料筒的针头直径为200-500μm；所述3D打印处理的每层层厚为打印料筒针头直径的70%-85%；所述3D打印处理的挤出纤维间距为纤维直径的0.8-2.5倍；所述3D打印处理的挤出纤维间距为150-1000μm。

5.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述3D打印处理的接收平台温度为-20~30℃；3D打印处理的挤出压力为0.2-4 bar；3D打印处理的速率为0.2-2.3 mm/s。

6.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述交联剂为氯化钙溶液、戊二醛溶液、京尼平溶液中的一种以上。

7.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述冷冻干燥的时间为48 h ± 24 h。

8.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述灭菌处理为辐射灭菌。

9.根据权利要求1所述的负载microRNA组织工程支架的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述microRNA溶液的溶剂为超纯水、PBS或Opti-MEM；所述microRNA溶液的浓度为6 μmol/L；所述灭菌后的支架与microRNA溶液的质量体积比为60:1-40:1 g/L；所述静置的时间为12-48小时。

10.一种由权利要求1-9任一项所述的制备方法制得的负载microRNA组织工程支架。