[发明专利]用于脊髓损伤修复的3D打印生物墨水、制备方法与应用

权利要求书

1.一种用于脊髓损伤修复的3D打印生物墨水的制备方法，其特征在于包括：

对壳聚糖进行化学改性，获得羟丁基壳聚糖，所述羟丁基壳聚糖的结构式如式(1)所示：

其中，式(1)中n为300～3000，并且所述羟丁基壳聚糖的成胶温度为20～60℃，在37℃下的固化时间为10～20秒；

将巯基修饰到透明质酸上，获得巯基修饰的透明质酸；

将二乙烯砜基修饰到透明质酸上，获得二乙烯砜基修饰的透明质酸；

将羟丁基壳聚糖、巯基修饰的透明质酸和二乙烯砜基修饰的透明质酸混合均匀，获得用于脊髓损伤修复的3D打印生物墨水。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于包括：采用碱性物质对壳聚糖进行碱化处理，获得碱化的壳聚糖，之后进行醚化处理，获得羟丁基壳聚糖。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于具体包括：在氮气气氛中，使包含壳聚糖、碱性物质水溶液的第一混合反应物于室温反应12～48h，获得碱化的壳聚糖；

将碱化的壳聚糖分散于异丙醇和/或水溶液中，搅拌12～48h后加入1，2-环氧丁烷反应0.5～2h，之后再于40～70℃反应12～48h，经后处理，获得羟丁基壳聚糖。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖的重均分子量为100000～1000000。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖的重均分子量为200000～400000。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述碱性物质为氢氧化钠和/或氢氧化钾。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖与碱性物质水溶液的质量体积比为1∶(15～25)g/mL。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述碱化的壳聚糖与1，2-环氧丁烷的质量体积比为1∶(15～25)g/mL。

9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述后处理包括：在所述反应完成后，将反应液的pH值调节至6.5～7.5，之后用截留分子量为8000～14000的透析袋透析48～96h。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于包括：

使透明质酸与离子交换树脂混合均匀，于20～30℃反应12～24h后过滤，以四丁基氢氧化铵溶液将过滤所得液相的pH值调节至6.5～7.5，再于-40～-60℃冷冻干燥48～72h，获得四丁铵修饰的透明质酸；

在氮气气氛中，使包含四丁铵修饰的透明质酸、3，3’-二硫代丙酸、4-二甲基氨基吡啶、二碳酸二叔丁酯和有机溶剂的第二混合反应体系于20～30℃反应18～30h，获得二硫代丙酸修饰的透明质酸；

使包含二硫代丙酸修饰的透明质酸、二硫苏糖醇、氯化物和水的第三混合反应体系于pH值为8.0～9.0的条件下，在20～30℃反应2～4h，对反应所获产物在-40～-60℃进行冷冻干燥48～72h，获得巯基修饰的透明质酸。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于：所述透明质酸的重均分子量为30000～200000。

12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于：所述透明质酸的重均分子量为40000～80000。

13.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于：所述透明质酸与离子交换树脂的质量比为1∶1～1∶3。