[发明专利]一种替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐有关物质的分析方法

说明书

本发明涉及药物分析技术领域，特别涉及一种替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐有关物质的高效液相检测方法。本发明公开了替诺福韦艾拉酚胺的10个相关杂质同时分离度分析方法。本发明能有效准确测定替诺福韦艾拉酚胺中的各有关物质与含量，保证产品质量。

技术领域

本发明涉及化学药物分析方法技术领域，具体涉及一种测定替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐有关物质的分析方法。

背景技术

替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐(Tenofovir Alafenamide Fumarate)，化学名为9-[(R)-2-[((S) -[[(S)-1-(异丙氧基羰基)乙基]氨基]苯氧基氧膦基)甲氧基]丙基]腺嘌呤半富马酸盐，其分子式为C₂₁H₂₉O₅N₆P·1/2(C₄H₄O₄)，分子量为534.51，其结构式如下：

乙型肝炎病毒感染为世界性传染病，据世卫组织报道，全球约20亿人曾感染乙型肝炎病毒，且每年约有百万人死于乙型肝炎感染所致的肝硬化或肝衰竭。目前我国应用于抗乙肝病毒的核苷酸类药物仅有拉米夫定、阿德福韦酯、替比夫定、恩替卡韦与替诺福韦酯等药物，在抗核苷酸类治疗乙型肝炎的过程中，耐药性是较为棘手的问题，而替诺福韦艾拉酚胺的开发为临床治疗乙型肝炎感染提供了新的选择。而在替诺福韦艾拉酚胺原料药的生产过程中可能引入起始原料、中间体、副产物及手性异构体等有关物质，同时在原料药与制剂的生产、贮藏与运输过程中，亦可能产生副产物或其他降解产物，因此对有关物质的测定对药品质量的把控极为重要。目前并无文献对替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐原料与制剂的有关物质具体测定进行报道，故摸索合适的色谱条件，调整相应色谱参数，对相应杂质进行控制十分必要。

发明内容

本发明提出了一种测定替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐有关物质的分析方法，本发明能够解替诺福韦艾拉酚胺有关物质个数较多，分离较为困难的问题。

本发明的技术方案包括：

替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐有关物质测定的高效液相色谱方法，包括下列步骤：

(1)制备替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐分析溶液；

(2)采用高效液相色谱法，其色谱条件包括：色谱柱为十八烷基键合硅胶色谱柱，以磷酸盐缓冲液与甲醇体积比为92:8的溶液为流动相A，以磷酸盐缓冲液与甲醇体积比为30:70 的溶液为流动相B。梯度洗脱过程为：流动相中A，B两相的比例按0、15～20、35～38、40～45、 50、60分钟时间点，A相比例为90～95％、40～45％、30～35％、0％、90～95％、90～95％，检测波长为260nm。

(3)样品测定：取步骤(1)中制备的分析溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，分离以下有关物质：

优选方案，替诺福韦艾拉酚胺半富马酸盐有关物质的分析方法，主要包括下列步骤：

(1)配制分析溶液

用甲醇、乙腈单一溶剂或甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸盐水溶液及乙腈-磷酸盐水溶液混合溶液溶解样品，配制成分析溶液。

(2)色谱条件

采用高效液相色谱法，其色谱条件包括：色谱柱为十八烷基键合硅胶色谱柱，以磷酸盐缓冲液与甲醇体积比为92:8的溶液为流动相A，以磷酸盐缓冲液与甲醇体积比为30:70的溶液为流动相B，检测波长为260nm，进行梯度洗脱。

根据本发明，色谱柱的长度为150mm，直径为4.6mm，填料粒径为5μm。

根据本发明，色谱柱填料为十八烷基键合硅胶，优先地，色谱柱型号为ACE ExcelC18。