[发明专利]一种妇科再造丸HPLC指纹图谱及多指标定量的建立方法

说明书

本发明公开了一种妇科再造丸HPLC指纹图谱及多指标定量的建立方法。该方法建立全方的HPLC指纹图谱，在一张色谱图中标定了分离度良好的35个特征色谱峰，指认了15个成分，并建立了11个目标成分的多指标定量方法。本发明本发明可快速、准确地鉴定不同厂家、不同批号产品中主要成分的种类及数量，并对多指标成分进行定量分析，从而鉴别产品的真伪优劣，具有简单、高效、准确可靠、重复性好的优点，可用于企业妇科再造丸的质量控制及鉴别不同厂家产品的优劣的有益效果。

技术领域

本发明涉及一种HPLC指纹图谱及多指标定量的建立方法,特别是一种妇科再造丸HPLC指纹图谱及多指标定量的建立方法。

背景技术

妇科再造丸源自贵州四大名医之首王聘贤(1895～1964)先生的经验方，包含党参、白芍、香附(醋炙)、黄芪、熟地黄、茯苓、当归(酒炙)等42味中药，其有补益肝肾、养血调经、暖宫止痛的功效。用于月经先后不定期、带经日久、痛经、带下等妇科病症，临床应用已有80余年，疗效确切。妇科再造丸的制备工艺如下：首先黄芪、杜仲、熟地黄、续断、秦艽、肉苁蓉、牛膝、地骨皮8味中草药加水煎煮得滤液再浓缩，阿胶加水烊化后与制得的浓缩液合并浓缩成清膏，再将其余的33味中草药细粉与清膏混合泛丸制成药丸，干燥，包衣即得，现收载于国家药品监督管理局2002年颁布的《国家中成药标准汇编-外科妇科分册》。

妇科再造丸是由42味药材组成的大复方，涵盖植物药、动物药与矿物药，成分复杂，关于妇科再造丸的质量评价，现有的标准及文献报道了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、单一成分的含量测定等。国家中成药标准中采用TLC法进行香附、白芍、陈皮、黄芩药材的鉴别，丹参酮及丹参的专属性薄层鉴别，以及采用高液相色谱(HPLC)法测定芍药苷的含量。中药特别是中药复方制剂化学成分非常复杂，简单测定一种或几种化合物的含量，不能够体现出中药复方制剂的内部质量，目前指纹图谱和多指标定量已经成为评价中药及其复方制剂的有效方法，可以反映中药及其复方的整体质量，达到对中药质量稳定的有效控制的要求。目前，中国专利(申请号：201711083060.4)公开了一种妇科再造丸的检测方法，其采用HPLC建立产品中白芍苷、黄芩苷和丹酚酸B含量的测定方法，其采用不同的色谱条件对3个成分进行检测，存在单独检测3个成分，样品处理繁琐、检测周期长；检测指标少，不能较全面反映妇科再造丸的质量。中国专利(申请号：201610304060.1)公开了一种妇科再造丸UPLC指纹图谱的建立方法，其采用UPLC建立了妇科再造丸的指纹图谱，并确定了15个共有峰，但是，其未指认共有峰的成分，并进行指标成分的定量分析，存在检测设备贵、共有峰较少、未进行指标成分的定量分析，不能较全面的体现妇科再造丸产品的质量。徐剑等建立了妇科再造丸UPLC指纹图谱，标出有15个共有峰，并对指标成分橙皮苷和黄芩苷进行含量测定，但是，其同样没有确定其成分，多指标成分太少不能充分反馈妇科再造丸的质量，且超高效液相色谱仪(UPLC)价格昂贵，对色谱柱要求较高，在中国制药企业尚不普遍，还不是中药质量控制的主要方法。

因此，建立妇科再造丸HPLC指纹图谱及多指标定量的方法，对共有峰及指认成分多并能进行多指标定量分析、才能全面体现妇科再造丸质量的方法。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种妇科再造丸HPLC指纹图谱及多指标定量的建立方法。本发明可快速、准确地鉴定不同厂家、不同批号产品中主要成分的种类及数量，并对多指标成分进行定量分析，从而鉴别产品的真伪优劣，具有简单、高效、准确可靠、重复性好的优点，可用于企业妇科再造丸的质量控制及鉴别不同厂家产品的优劣的特点。

本发明的技术方案：一种妇科再造丸HPLC指纹图谱及多指标定量的建立方法，包括有以下步骤：

(1)对照品溶液的配制线性关系：