[发明专利]含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系与试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系，其特征在于，所述含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系，记为CFPS(Mg+)体系，包括外源镁离子；所述外源镁离子来自一种或多种供源，至少包括葡萄糖酸镁；所述CFPS(Mg+)体系能够与编码外源蛋白的核酸模板共同提供合成外源蛋白所需的翻译相关元件，通过体外蛋白合成反应表达得到外源蛋白。

2.根据权利要求1所述含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系，其特征在于，所述外源镁离子的供源还可选地包括以下至少一种组分：天门冬氨酸镁、醋酸镁、谷氨酸镁、氯化镁、磷酸镁、硫酸镁、柠檬酸镁、磷酸氢镁、碘化镁、乳酸镁、硝酸镁、草酸镁；

优选之一，所述外源镁离子的供源为葡萄糖酸镁和天门冬氨酸镁的组合；

更优选之一，所述外源镁离子的供源为葡萄糖酸镁和L-天门冬氨酸镁的组合；

优选之一，所述外源镁离子的供源为葡萄糖酸镁和谷氨酸镁的组合；

更优选之一，所述外源镁离子的供源为葡萄糖酸镁和L-谷氨酸镁的组合；

优选之一，所述外源镁离子的供源为葡萄糖酸镁、天门冬氨酸镁和谷氨酸镁的组合；

更优选之一，所述外源镁离子的供源为葡萄糖酸镁、L-天门冬氨酸镁和L-谷氨酸镁的组合；

优选之一，所述葡萄糖酸镁提供的外源镁离子占总的外源镁离子的摩尔百分比，选自下述任一个百分比数值，或者下述任两个百分比数值之间的数值范围：25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、100％；所述数值范围包括两个端点。

3.根据权利要求1-2中任一项所述含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系，其特征在于：能够提高外源蛋白合成量的葡萄糖酸镁用量记为Q_MgP；

所述Q_MgP选自Y_PRT(C_MgP)曲线中Y_PRT大于Y₀时的葡萄糖酸镁用量区间；其中，C_MgP指葡萄糖酸镁用量，Y_PRT指外源蛋白表达量，Y_PRT(C_MgP)曲线指以葡萄糖酸镁用量为自变量、外源蛋白表达量为因变量、其它反应参数均确定时的曲线；Y₀指所述C_MgP为0时对应的外源蛋白表达量；

优选地，所述Q_MgP选自外源蛋白表达量至少为Y₀+50％Y_Δ时的葡萄糖酸镁用量区间；

更优选地，所述Q_MgP选自外源蛋白表达量至少为Y₀+60％Y_Δ时的葡萄糖酸镁用量区间；

更优选地，所述Q_MgP选自外源蛋白表达量至少为Y₀+70％Y_Δ时的葡萄糖酸镁用量区间；

更优选地，所述Q_MgP选自外源蛋白表达量至少为Y₀+80％Y_Δ时的葡萄糖酸镁用量区间；

更优选地，所述Q_MgP选自外源蛋白表达量至少为Y₀+90％Y_Δ时的葡萄糖酸镁用量区间；

更优选地，所述Q_MgP选自外源蛋白表达量至少为Y₀+95％Y_Δ时的葡萄糖酸镁用量区间；

更优选地，所述Q_MgP采用外源蛋白最高表达量时的葡萄糖酸镁用量C_max；

其中，所述Y_Δ＝Y_max-Y₀；其中，所述Y_max指Y_PRT(C_MgP)曲线中外源蛋白的最高表达量。