[发明专利]一种干细胞因子冻干粉及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种干细胞因子冻干粉,通过以下方法制备得到：(1)将干细胞富因子溶液离心，以去除细胞碎片及其他大颗粒杂质；(2)向上述离心后得到的溶液中加入G10～G50葡聚糖凝胶，浸泡1～12h，此时无机盐分子会进入凝胶网孔，细胞因子等蛋白质及多肽则由于分子量过大被排阻在凝胶网孔之外；然后用筛网过滤去除吸附无机盐溶液溶胀后的凝胶，得干细胞因子浓缩液，冷冻干燥，得到冻干粉，可作为原料用于制备美容品、化妆品。本发明的干细胞因子冻干粉，增加葡聚糖凝胶过滤，可去除大量无机盐成份，且对干细胞因子起到浓缩作用；冻干可以极大增加原料的有效期、降低保存难度，更有利于实现规模化应用。

技术领域

本发明涉及一种干细胞因子冻干粉，及其制备方法，与在制备美容品、化妆品中的应用。

背景技术

脐带间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells，MSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，具有较高的分化潜能，能够分化成多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。科学数据表明，干细胞随着人的年龄增长，无论从数量上还是质量上都有所降低，这是人体衰老的关键因素。生存时间和复制次数的增加，会导致干细胞内基因水平上错误信号的积累，这意味着，即便能够获得这些细胞并实现扩增，这些细胞的干细胞特性也受到了损伤。而从脐带组织中获得的脐带间充质干细胞，细胞含量、增殖能力都比较好，免疫原性低，且具有取材方便、无伦理学争议等优点。

脐带间充质干细胞在生长过程中会分泌大量生长因子，比如表皮生长因子(EGF)、(HGF)、PDGF等，该类因子在抗衰老美容方面有显著作用，在生物美容领域具有极其广阔的应用前景。现有技术中已有很多利用间充质干细胞富因子溶液作为生物美容原料的研究，但目前市面上对该类因子的应用较为简单，获取干细胞培养上清液后，仅仅通过一步离心去除细胞碎片，该方法有效去除了上清液中的死细胞和细胞碎片，但由原培养液带来的大量无机盐和其他潜在危害的小分子成份并未得到清除，直接用于生物美容原料会带来一定的风险。另外，由于干细胞因子在溶液中稳定性不佳，活性极易下降而失效，不利于作为生物美容原料应用。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种干细胞因子冻干粉，及其制备方法，以及其在制备美容品、化妆品中的应用。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种干细胞因子冻干粉的制备方法，步骤如下：

(1)将干细胞富因子溶液离心，以去除细胞碎片及其他大颗粒杂质；

(2)向上述离心后得到的溶液中加入G10～G50葡聚糖凝胶(G10-G50规格适用于分子量小于5000的小分子，比如G10、G15、G25、G50；葡聚糖凝胶加入的量与无机盐的浓度有关)，浸泡1～12h，此时无机盐分子会进入凝胶网孔，细胞因子等蛋白质及多肽则由于分子量过大被排阻在凝胶网孔之外；然后用筛网过滤去除吸附无机盐溶液溶胀后的凝胶，得干细胞因子浓缩液，分装至西林瓶，每支2～5ml，放入冷冻干燥机冷冻干燥，得到冻干粉，压盖密封，于-20℃保存。

所述步骤(1)中，离心时的离心力为500～5000g，优选3000g。

所述步骤(1)中，离心的时间为5～20min，优选10min。

所述步骤(1)中，所述干细胞富因子溶液，选自间充质干细胞培养上清液，即：间充质干细胞生长汇合度达到70％～100％(优选90％)时，收集其培养上清液，为现有技术。

所述步骤(2)中，G10～G50葡聚糖凝胶的终浓度为4～50g/mL。

所述步骤(2)中，筛网的孔径为8～100目，优选40目。

利用上述方法制备得到的干细胞因子冻干粉，作为原料在制备美容品、化妆品中的应用。