[发明专利]桔贝合剂HPLC指纹图谱的建立方法

说明书

本发明公开了一种桔贝合剂HPLC指纹图谱的建立方法，该方法包括供试品溶液的制备、HPLC色谱条件的确定及HPLC标准指纹图谱的制作，本发明同时公开了由该方法得到的桔贝合剂HPLC标准指纹图谱，所得指纹图谱有13个共有峰。本发明方法操作简便、稳定性高、重现性好，所得图谱特征峰多，通过标准指纹图谱中共有峰的比较，可对桔贝合剂的质量进行全面地评价和控制，有利于稳定产品质量，确保其内在质量的均一和稳定，确保临床用药的安全性和有效性。

技术领域

本发明涉及一种桔贝合剂HPLC指纹图谱的建立方法，属于中药制剂分析领域。

背景技术

桔贝合剂收载于卫生部药品标准中药成方制剂第二册(编号：WS₃-B-0369-90)，由桔梗、浙贝母、苦杏仁、麦冬、黄芩、枇杷叶、甘草七味中药原料制备组成，具有润肺止咳功能，主治肺热咳嗽、痰稠色黄、咳痰不爽，临床效果显著。

目前，卫生部药品标准中关于桔贝合剂的现行检查方法主要是检查其相对密度和pH，其中规定制剂的相对密度应不低于1.10，pH值应为4.5～5.5。中药复方制剂成分复杂，仅检查相对密度和pH值，质控点单一，不足以全面反映桔贝合剂的质量优劣。此外，目前关于桔贝合剂质量标准的研究大多采用薄层色谱法进行成分的定性鉴别，并采用高效液相色谱法进行药效成分含量测定。徐小利等开展了桔贝合剂质量标准研究，采用薄层色谱法分别鉴别处方中的浙贝母和枇杷叶，采用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量(徐小利,姚丽佳,陈晓虎.桔贝合剂质量标准研究[J].中国药业,2009,18(06):29-30.)；沈立茹等采用超高效液相色谱(UPLC)同时测定桔贝合剂中甘草苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量(沈立茹,张爱兵,裴璐,李瑞宏,郑百芹,强立新.桔贝合剂中5种成分的含量测定[J].中南药学,2019,17(06):868-871.)。从处方组成可以发现，桔贝合剂由七味中药制成，原料多样，成分复杂，现有质量标准研究仅用薄层色谱法鉴定其中几味原料药材，以及采用高效液相色谱法检测其中一个或多个标志性成分的含量，以此评价桔贝合剂的优劣真伪，显然难以全面、准确地评价其质量与疗效，也不能反映桔贝合剂的整体协同作用的特点。

中药指纹图谱作为一项质量控制技术，能够较为全面的控制药品的质量，具有系统性、整体性和稳定性特点。目前，以指纹图谱控制桔贝合剂的质量，国内外尚未见专利公开及文献报道。本发明公开了一种桔贝合剂的HPLC指纹图谱，以及用该方法制作的桔贝合剂HPLC标准指纹图谱。在使用相似度进行评价的情况下，可用其标准指纹图谱对桔贝合剂的质量进行全面地评价和控制，从而保证了产品质量的稳定性及临床用药的安全性与有效性。

发明内容

本发明的目的是针对现有桔贝合剂的质量控制方法不足，提供一种桔贝合剂HPLC指纹图谱的建立方法。其特点是将桔贝合剂制成供试品溶液，经过HPLC分离检测，获得桔贝合剂HPLC指纹图谱，从而为桔贝合剂的真伪鉴别和内在质量控制提供可靠依据。高液相色谱法具有简便准确，灵敏度高，重复性好，检测器种类多等特点，是构建指纹图谱的重要方法之一。

一种桔贝合剂HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括下列步骤：

1)桔贝合剂供试品溶液的制备；

2)HPLC色谱条件的确定：色谱柱：Agilent ZORBAX SB C₁₈柱；流动相：乙腈为流动相A，0.16％-0.22％磷酸溶液为流动相B；采用梯度洗脱；检测波长：253-258nm，流速：0.5-1.5ml/min，柱温：32-36℃；

3)HPLC标准指纹图谱的制作：按步骤2)色谱条件对桔贝合剂供试品溶液进行分析比较，得到桔贝合剂标准指纹图谱。

优选地，按步骤2)色谱条件对22批次桔贝合剂供试品溶液进行分析比较，得到桔贝合剂标准指纹图谱。

优选地，所述梯度洗脱条件为：