[发明专利]一种脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒及其应用，属于生物化学技术领域。所述的试剂盒包括R1和R2双试剂，用于测定脂蛋白磷脂酶A2的活性。本试剂盒稳定性好，使用前无需配制，且有效期长，可用于冠心病或脑卒中等不良心血管事件的风险的预测，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种脂蛋白磷脂酶A2活性的检测试剂盒，以及在临床检测中的应用。

背景技术

脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是丝氨酸依赖的磷脂酶，属于磷脂酶家族，由441个氨基酸组成，主要由炎症细胞(如巨噬细胞、淋巴细胞等)分泌。研究证明，Lp-PLA2在心血管疾病检测方面具有重要意义：①Lp-PLA2是血管炎症特异性标志物，其含量增加可以提示心血管疾病风险性的增加；②各种动脉粥样硬化相关的心脑血管栓塞性疾病的风险评估，包括脑卒中、冠心病等不良心血管事件的风险评估；③各种动脉粥样硬化相关的心脑血管栓塞性疾病治疗效果评估。

目前，对于Lp-PLA2的检测主要是利用免疫学上抗原-抗体的反应原理，测定Lp-PLA2的质量，并不能确定其中Lp-PLA2的酶活。有研究显示，Lp-PLA2促动脉粥样硬化的作用来源于其酶活而不是质量。对于Lp-PLA2发生氨基酸突变的人群，如果突变的氨基酸影响了Lp-PLA2的酶活，那么质量检测与酶活检测结果就不一致，因而可能与临床不符。所以，临床上需要对Lp-PLA2的活性进行检测。虽然市面上已有Lp-PLA2活性检测的试剂，但是试剂的稳定性差，在使用前需现配现用，不便于临床使用。

发明内容

为此，需要提供一种快速、方便、稳定的脂蛋白磷脂酶A2活性检测试剂盒，便于临床推广使用。

本发明提供的技术方案如下：

一种脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒，所述的试剂盒包括R1和R2双试剂；其中R1试剂的成分包括4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液；R2试剂的成分包括1-十四酰基-2-4-对硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰胆碱、1-十四酰基-2-4-对硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰乙醇胺、1-十四酰基-2-4-对硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰甘油或1-十四酰基-2-4-对硝基苯酚丁二酸酐-3-磷酸，其中的一种以上。

进一步的，所述的R1试剂的配方为4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)100-150mM，NaCl0.8-1.0％，EDTA·Na25-10mM，pH 7.4-7.6。

所述的R2试剂的配方为柠檬酸20-30mM，NaCl 0.8-1.0％，EDTA·Na2 5-10mM，3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)5-10mM，正壬烷磺酸钠5-10mM，pH2.4-2.6，1-十四酰基-2-4-对硝基苯酚丁二酸酐-3-磷脂酰胆碱(DNGP)15-25mM，二甲基亚砜(DMSO)30-40％。

进一步的，所述的脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒在检测血液中脂蛋白磷脂酶A2活性中的应用。

进一步的，所述的脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒在预测冠心病或脑卒中风险中的应用。

区别于现有技术，上述技术方案的有益效果在于：本试剂盒测定脂蛋白磷脂酶A2的活性，且为双试剂，稳定性好，使用前无需配制，即开即用。本试剂盒可以在全自动生化分析仪上使用，有效期长，可达12个月。本试剂盒可用于冠心病或脑卒中等不良心血管事件风险的评估。

具体实施方式

为详细说明技术方案的技术内容、所实现目的及效果，以下结合具体实施例详予说明。

实施例1