[发明专利]蛹虫草预防和治疗肝癌的产品制备方法及应用

说明书

本发明建立了蛹虫草预防和治疗肝癌的产品制备方法及应用，属于蛹虫草产品开发技术领域。以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分，并按照一定的配方工艺制作而成的产品。初步毒性、药效等实验结果表明，该产品无毒性、具有治疗肝癌的功效。由于药效成分及辅料均来自蛹虫草提取，本产品对人体无毒副作用，可以安全用于大众预防和治疗肝癌。

技术领域

本发明涉及蛹虫草开发技术领域，具体涉及蛹虫草预防和治疗肝癌的产品的开发和应用。

背景技术

根据最新的统计，我国已经成为名副其实的肝癌大国，最年轻患者仅19岁。 2019年，全世界一半以上的肝癌病例都发生在中国，80％查出即是晚期，预防肝癌的发生是解决问题的关键所在。

冬虫夏草是虫草菌寄生在鳞翅目蝙蝠蛾科幼虫中以其为载体的虫菌复合体，含有丰富的蛋白质、脂肪、虫草酸、核苷类物质和多种氨基酸等活性物质，味道清香，早在一七五七年《本草从新》中就有“冬虫夏草甘平保肺，益肾，补精髓，止血化痰，已劳咳，治膈症皆良”的记载。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳萎遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。目前研究证明蛹虫草具有抑制肿瘤、止咳镇静、驱风、散热、驻容美颜、延缓衰老、提高机体免疫力、镇静催眠等作用。

蛹虫草(Cordycepsmilitaris)，属于新资源食品(卫生部公告2009年第3号)，在分类学上与冬虫夏草同归于虫草属,是一种珍贵的药用真菌，经本实验室研究证明，蛹虫草与冬虫夏草化学成分70％以上是相似的，药理作用与冬虫夏草相似，在临床上可替代冬虫夏草入药。由于冬虫夏草对生长环境的要求苛刻，导致冬虫夏草资源极为有限而不能满足日益增加的市场需求。目前，人工栽培蛹虫草已获成功，并实现了规模化生产，我们可以用人工栽培蛹虫草代替冬虫夏草入药。

我们选取蛹虫草为原料，通过溶剂提取、色谱分离获得抗失眠有效成分麦角甾醇，再配比虫草素、虫草提取物，以期开发一系列绿色、健康的具有预防和治疗肝癌功效的食品或药物，为预防肝癌的发生、受肝癌影响生活的大众解决身体健康问题。

发明内容

本发明建立了蛹虫草预防和治疗肝癌的产品制备方法及应用，本产品对人体无毒副作用，可以安全用于人体预防和治疗肝癌，包括以下步骤：

(1)麦角甾醇(C310-6-2)、虫草素、C3-12的制备

(a)取烘干的蛹虫草子实体，进行超低温粉碎。在超微粉中加入一定量超纯水，加热提取3次，每次3h，合并提取液，浓缩备用，取浓缩物用适量水分散，加入95％乙醇至乙醇终浓度为80％，充分混匀后，置4℃冰箱中沉淀过夜，离心，获得上清液和沉淀，浓缩，干燥备用；

(b)取(a)获得的上清液，加入15％甲醇-水溶解至浓度为200mg/ml，微孔滤膜过滤，用高效液相色谱进行分离，色谱柱为DAC150(150*250mm C18 10μm)，洗脱方式为15％甲醇-水等度洗脱70min，紫外检测波长为260nm，收集35-50min 馏分，浓缩干燥后即得虫草素样品；

(c)取(a)获得的沉淀，加入丙酮提取，离心后取上清液，用高效液相色谱进行分离，色谱柱为DAC150(150*250mm Silica 10μm)，洗脱45min，依次为 100％正己烷10min、25％乙酸乙酯-正己烷25min、100％乙酸乙酯10min，紫外检测波长为260nm，收集18-25min馏分，烘干备用，收集35-45min馏分，浓缩干燥后即得C3-12样品；

(d)取(c)收集的18-25min馏分，加入二氯甲烷溶解至浓度为200mg/ml，微孔滤膜滤过，用高效液相色谱进行分离，色谱柱为DAC150(150*250mm Silica 10μm)，洗脱40min，紫外检测波长为260nm，收集18-30min馏分，浓缩干燥后即得麦角甾醇(C310-6-2)样品；

(2)产品制作