[发明专利]蛹虫草预防和治疗肝癌的产品制备方法及应用

权利要求书

1.蛹虫草预防和治疗肝癌的产品制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)麦角甾醇(C310-6-2)、虫草素、C3-12的制备

(a)取烘干的蛹虫草子实体，进行超低温粉碎，在超微粉中加入一定量超纯水，加热提取3次，每次3h，合并提取液，浓缩备用。取浓缩物用适量水分散，加入95％乙醇至乙醇终浓度为80％，充分混匀后，置4℃冰箱中沉淀过夜，离心，获得上清液和沉淀，浓缩，干燥备用；

(b)取(a)获得的上清液，加入15％甲醇-水溶解至浓度为200mg/ml，微孔滤膜过滤，用高效液相色谱进行分离，色谱柱为DAC150(150*250mm C18 10μm)，洗脱方式为15％甲醇-水等度洗脱70min，紫外检测波长为260nm，收集35-50min馏分，浓缩干燥后即得虫草素样品；

(c)取(a)获得的沉淀，加入丙酮提取，离心后取上清液，用高效液相色谱进行分离，色谱柱为DAC150(150*250mm Silica 10μm)，洗脱45min，依次为100％正己烷10min、25％乙酸乙酯-正己烷25min、100％乙酸乙酯10min，紫外检测波长为260nm，收集18-25min馏分，烘干备用，收集35-45min馏分，浓缩干燥后即得C3-12样品；

(d)取(c)收集的18-25min馏分，加入二氯甲烷溶解至浓度为200mg/ml，微孔滤膜过滤，用高效液相色谱进行分离，色谱柱为DAC150(150*250mm Silica 10μm)，洗脱40min，紫外检测波长为260nm，收集18-30min馏分，浓缩干燥后即得麦角甾醇(C310-6-2)样品；

(2)产品制作

本产品以麦角甾醇(C310-6-2)、虫草素、C3-12为原料，麦角甾醇(C310-6-2)质量占比为30％、虫草素质量占比为30％、C3-12质量占比为40％混合制作而成；

根据后期剂型需求不同，麦角甾醇(C310-6-2)、虫草素、C3-12可以以任意比例、再配合其他剂型辅料进一步加工为片剂、胶囊、颗粒剂、冲剂等系列产品。

2.根据权利要求1所述的以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)(a)中的中的超微粉碎处理是将烘干处理后的蛹虫草原料，使用50-80目筛网的粉碎机进行粗粉碎处理，并对粗粉碎处理后的蛹虫草原料，使用超微粉碎机进行粉碎处理(300-500目)，得到所述蛹虫草超微粉。

3.根据权利要求1所述的以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)(a)中的提取操作是指每隔0.5h搅拌一次，提取时间为每次3h，合并提取液，浓缩。

4.根据权利要求1所述的以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)(a)中加入提取溶剂的质量是沉淀物的质量的1.5-2.5倍。

5.根据权利要求1所述的以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)(a)中的离心处理是指将降温处理后的所述浓缩提取液置于离心瓶中，离心温度为8-12℃，离心时间为0.5-1.5h，转速为3000-6000rpm/min。

6.根据权利要求1所述的以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)(b)制备液相使用的色谱柱填料为直径10μm的C18，大小为150mm×250mm，洗脱方式为：15％甲醇-水等度洗脱70min，紫外检测波长为260nm，上样量为200mL，流速为600mL/min。

7.根据权利要求1所述的以蛹虫草为原料，提取分离抗肝癌药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)(c)中制备液相使用的色谱柱填料为直径10μm的Silica，大小为150mm×250mm，洗脱方式为：洗脱45min，依次为100％正己烷10min、25％乙酸乙酯-正己烷25min、100％乙酸乙酯10min，紫外检测波长为260nm，收集18-25min馏分，上样量为200mL，流速为600mL/min。