[发明专利]促进毛发再生的外用药物组合物及制备方法

权利要求书

1.一种促进毛发再生的外用药物组合物，包括间充质干细胞无血清培养基上清，其特征在于，还包括与该间充质干细胞无血清培养基上清联用的维甲酸。

2.根据权利要求1所述的促进毛发再生的外用药物组合物，其特征在于，所述的维甲酸的质量分数0.024%~0.026%。

3.一种如权利要求1所述促进毛发再生的外用药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将干细胞无血清培养基上清分装后置于4℃保存，与质量分数0.024%~0.026%的维甲酸进行混合，得到最终药物组合物。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的间充质干细胞无血清培养基上清的制备过程如下：

S1.冲洗脐带，去除脐带表面残留的血液，剪成5×5×5毫米以下的块状，均匀涂布于培养皿上，再缓慢加入α-MEM完全培养基进行培养，确保脐带组织可以更加均匀，得到待培养样本；

S2.将S1步骤的待培养样本置于温度为37℃且体积分数为5％的二氧化碳饱和湿度培养箱内，直至干细胞长出约占满细胞培养皿75~85 %面积后，使用0.25 %胰酶消化传代；

S3.待S2步骤的胰酶消化传代传至第三代后，培养48 h后采用低速离心法获取上清，最终得到间充质干细胞无血清培养基上清。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：S1步骤中所述的α-MEM完全培养基的培养体系为：α-MEM基础培养基中加入谷氨酰胺 1.8~2.2mM；氢化可的松 49~51μg/L；硫酸锌 0.9~1.1mg/L；丁酸钠 1.9~2.1mM；柠檬酸铁 190~210μM；维生素C 190~210μM；重组人表皮生长因子 19~21μg/L；重组人碱性成纤维细胞生长因子 19~21μg/L；RGD短肽 19~21μg/L；棕榈酰三肽49~51μg/L；棕榈酰四肽39~41μg/L；氯化锂4~6mM；L-谷胱甘肽 3~5mg/L；大豆胰酶抑制剂 90~110mg/L；β-巯基乙醇 2.4~2.6mg/L；乙醇胺 0 .1~0.3g/L；亚硒酸钠0.00066~ 0.00068mg/L；丙酮酸钠 0.08~0.12mM；Hepes 0.008~0.012M；NaHCO 32~34mM。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于：所述的α-MEM完全培养基的最优培养体系为：谷氨酰胺 2mM；氢化可的松 50μg/L；硫酸锌 1mg/L；丁酸钠 2mM；柠檬酸铁 200μM；维生素C 200μM；重组人表皮生长因子 20μg/L；重组人碱性成纤维细胞生长因子 20μg/L；RGD短肽 20μg/L；棕榈酰三肽50μg/L；棕榈酰四肽40μg/L；氯化锂 5mM；L-谷胱甘肽 4mg/L；大豆胰酶抑制剂 100mg/L；β-巯基乙醇 2.5mg/L；乙醇胺 0 .2g/L；亚硒酸钠0.00067mg/L；丙酮酸钠 0.1mM；Hepes 0.01M；NaHCO33mM。