[发明专利]一种酶法合成头孢克洛的方法

权利要求书

1.一种酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、将7-氨基-3-氯-头孢烯酸加入混合溶剂中，调节pH至8.1-8.3，加入固定化头孢克洛合成酶，混合均匀，加入D-苯甘氨酸甲酯盐酸盐和D-苯甘氨酸甲酯的侧链混合物，进行酶催化合成反应，反应结束后分离反应液和固定化头孢克洛合成酶，得头孢克洛粗品；所述固定化头孢克洛合成酶为固定化青霉素酰化酶；

步骤二、将所述头孢克洛粗品重结晶，得头孢克洛产品；

其中，所述混合溶剂为如下质量百分含量的组分：甲醇0.5-10%，戊二醛0.5-1%，可溶性磷酸盐0.1-1%，余量为水；

所述可溶性磷酸盐为磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾中至少一种。

2.如权利要求1所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，所述7-氨基-3-氯-头孢烯酸与混合溶剂的质量体积比为6:45-55，其中质量的单位为克，体积的单位为毫升。

3.如权利要求1所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，所述侧链混合物中D-苯甘氨酸甲酯和D-苯甘氨酸甲酯盐酸盐的摩尔比为1.6-2.1:1。

4.如权利要求1所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，所述固定化头孢克洛合成酶的加入量为7-氨基-3-氯-头孢烯酸质量的0.25-0.5倍。

5.如权利要求1所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，步骤一中，所述酶催化合成反应的反应温度为15-25℃，反应时间为80-150min。

6.如权利要求1或3所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，步骤一中，将所述D-苯甘氨酸甲酯盐酸盐和D-苯甘氨酸甲酯的侧链混合物分成两等份，分两次加入：加入固定化头孢克洛合成酶后，加入一等份的侧链混合物，反应15-30min后加入另一等份的侧链混合物。

7.如权利要求1所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，步骤二中，所述重结晶的具体过程包括如下步骤：将所述头孢克洛粗品用酸溶液调节pH至0.5-1.5，过滤，得待结晶液；将所述待结晶液与碱溶液快速混合，得到pH3.5-5.0的混合液，于10-15℃养晶30-60min；再调节pH至3.5-4.0，于0-5℃继续养晶30-60min。

8.如权利要求7所述的酶法合成头孢克洛的方法，其特征在于，所述待结晶液与碱溶液的混合时间为1-2秒。