[发明专利]一种基于胶乳增强免疫比浊法测定CK-MB的试剂盒及其制备使用方法

说明书

本发明提供了一种基于胶乳增强免疫比浊法测定CK‑MB的试剂盒，包括反应缓冲液R1和胶乳试剂R2；反应缓冲液R1包括缓冲液、无机盐、增浊剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂；胶乳试剂R2包括通过CK‑MB多抗与不同粒径胶乳微球偶联而成的两种胶乳试剂组成液；其中，每种胶乳试剂组成液还分别包括胶乳保存液以及保存在胶乳保存液中的胶乳微球，胶乳保存液包括缓冲液、无机盐、稳定剂、防腐剂、表面活性剂。本发明还提供了一种基于胶乳增强免疫比浊法测定CK‑MB的试剂盒的制备使用方法。本发明的优点在于：操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好、检测结果不受操作影响，并且相比于化学发光法，价格上会有很大的优势。

技术领域

本发明涉及医学和生物检测试剂制备领域，尤其涉及一种基于胶乳增强免疫比浊法测定CK-MB的试剂盒及其制备使用方法。

背景技术

肌酸激酶(CK)有三种主要的同工酶，即CK-MM、CK-MB和CK-BB。肌酸激酶MB(CK-MB)是肌酸同工酶的一种，其在心脏的含量相对较高，是心肌酶谱中最有特异性的酶，是非常重要的心肌标志物之一。

CK-MB在临床诊断上具有十分重要的意义，在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时，人血清中的肌酸激酶水平迅速提高。研究发现，CK-MB在急性心肌梗塞(AMI)发病后4-8h升高，24h达到峰值，2-3d恢复正常。其特异性高，出现时间较早，故CK-MB作为重要的早期诊断手段之一而应用于AMI的早期诊断。

目前，临床上检测CK-MB的方法主要有免疫抑制法、速率法、胶体金法和化学发光法。国内现有多家注册CK-MB检测试剂盒(免疫抑制法)，例如英科新创(厦门)科技有限公司、武汉长新盛生物技术有限公司、深圳天深医疗器械有限公司等。化学发光法的注册公司有深圳市新产业生物医学工程股份有限公司、博奥赛斯(天津)生物科技有限公司等。目前市场上肌酸激酶测定试剂盒以免疫方法学方法为主。

基于胶乳增强免疫比浊法测定的CK-MB试剂盒，可以使用全自动生化分析仪检测肌酸激酶CK-MB，操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好、检测结果不受操作影响，并且相比于化学发光法，价格上会有很大的优势。

据此，目前急需一种基于胶乳增强免疫比浊法测定的CK-MB试剂盒。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好、检测结果不受操作影响，并且相比于化学发光法，价格上会有很大的优势的基于胶乳增强免疫比浊法测定CK-MB的试剂盒及其制备使用方法。

本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：

一种基于胶乳增强免疫比浊法测定CK-MB的试剂盒法，包括反应缓冲液 R1和胶乳试剂R2；

所述反应缓冲液R1包括的成分及相应含量为：缓冲液10-50mM，无机盐 5-30g/L，增浊剂10-50g/L，防腐剂0.05％-0.1％，稳定剂10-50g/L，表面活性剂0.5-3.0mL/L，溶剂为纯化水；

所述胶乳试剂R2包括通过CK-MB多抗与不同粒径胶乳微球偶联而成的两种胶乳试剂组成液，每种胶乳试剂组成液分别包括胶乳保存液以及保存在所述胶乳保存液中的CK-MB多抗标记的胶乳微球；其中，所述胶乳保存液包括的成分及相应含量为：缓冲液5-20g/L，无机盐5-15g/L，稳定剂20-100g/L，防腐剂0.05％-0.1％，表面活性剂1-5mL/L，溶剂为纯化水。

作为本发明的优选方式之一，在所述反应缓冲液R1中：

所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液、 2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸缓冲液中的一种；

所述无机盐为氯化钠、氯化镁、氯化钾、氯化锌、氯化钙中的一种或多种；