[发明专利]一种人AD7c-NTP单克隆抗体及其制备方法和应用在审
申请号: | 202010121705.4 | 申请日: | 2020-02-26 |
公开(公告)号: | CN111440237A | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 赵风强;董兵;杨春;吴妤;邬晓东 | 申请(专利权)人: | 北京博奥森生物技术有限公司;天津森郁生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K1/22;G01N33/68;G01N33/577 |
代理公司: | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人: | 王勇 |
地址: | 100000 北京市通州区中关村科技园区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 ad7c ntp 单克隆抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体的制备方法,其特征在于:通过以下步骤制备:以AD7c-NTP重组蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,再进行小鼠脾细胞和鼠骨髓瘤细胞融合及亚克隆,筛选特异性、效价高的单克隆抗体,最后腹水制备及纯化,获得抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的一种抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述AD7c-NTP重组蛋白具有SEQ ID NO.1序列,其制备方法如下:将人AD7c-NTP基因(SEQ ID NO.2)插入表达载体pET30a,构建pET30a-AD7c-NTP融合表达质粒,转化大肠杆菌,然后用IPTG诱导,纯化、复性得到人AD7c-NTP重组蛋白。
3.根据权利要求1所述的一种抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体的制备方法,其特征在于:BALB/c小鼠为8-12周龄雌性小鼠。
4.根据权利要求1所述的一种抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体的制备方法,其特征在于:抗人AD7c-NTP单克隆抗体是采用ELISA法(酶联免疫吸附试验)高通量筛选获得的。
5.根据权利要求1所述的一种抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体的制备方法,其特征在于:纯化方法为Protein A亲和纯化。
6.一种抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体,其特征在于:所述抗人AD7c-NTP蛋白的单克隆抗体如权利要求1~5任一项所述的制备方法制备得到。
7.一种AD7c-NTP抗体对筛选方法,其特征在于:采用棋盘滴定法进行AD7c-NTP抗原检测,选择灵敏度及特异性较好的配对抗体。
8.一种AD7c-NTP浓度的检测方法,其特征在于:通过鼠抗人AD7c-NTP单克隆抗体I1B10和鼠抗人AD7c-NTP单克隆抗体X1C11可基于免疫方法对人体组织、细胞或体液中AD7c-NTP浓度进行检测,优选对尿液样本中的人AD7c-NTP进行检测。
9.根据权利要求8所述的一种AD7c-NTP浓度的检测方法,其特征在于:所述体液包括尿液、脑脊液、血清或血液。
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