[发明专利]一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法

说明书

本发明涉及药物分析领域，具体公开了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，至少包括以下步骤：首先称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；其次再将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，可将杀鼠灵原药样品中的杂质进行有效分离，本发明采用的分析方法具有分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高的优点。

技术领域

本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法。

背景技术

制备液相色谱是以获取纯样品为目的的一种分离技术，自20世纪30年代应用于色素的分离至今，得到了长足发展。20世纪80年代高效制备液相色谱在医药工业中有了迅速的发展，90年代在蛋白的分离纯化上得到大量应用。如今，制备色谱几乎在社会生产生活的各个领域均有应用，如次生类代谢产物、天然产物、大分子化合物及某些重要的药用生物活性蛋白、生物治疗品与诊断试剂的分离纯化。

但是在现有技术中对杀鼠灵原药样品中未知杂质分离和纯化的方法较为复杂，由此研究一种精准、快速、高灵敏度、重复性高的分析方法是本领域技术人员研究的热点。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，至少包括以下步骤：

(1)称取待检测的杀鼠灵原药，加入溶剂溶解，得到杀鼠灵原药溶液；

(2)将杀鼠灵原药溶液注入色谱仪中进行检测，并控制其进样量、紫外检测波长、色谱柱、柱温、流动相和流速，得到结果。

作为本发明一种优选的技术方案，所述步骤(1)中的溶剂选自DMF、甲醇、乙腈、水中的一种或多种。

作为本发明一种优选的技术方案，步骤(1)中所述的溶剂为DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的体积比为1：(2～6)。

作为本发明一种优选的技术方案，所述杀鼠灵原药溶液的浓度为150～250mg/mL；所述进样量为8～18mL。

作为本发明一种优选的技术方案，所述紫外检测波长为220nm～360nm。

作为本发明一种优选的技术方案，所述色谱柱为Waters Xbridge C18，长度为250mm，内径为30mm，粒径10μm。

作为本发明一种优选的技术方案，所述流动相选自甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾水溶液、磷酸二氢钠水溶液中的一种或多种。

作为本发明一种优选的技术方案，所述流动相为乙腈和磷酸二氢钠水溶液。

作为本发明一种优选的技术方案，所述流动相在0～30min内为梯度洗脱，在0min时，乙腈和磷酸二氢钠水溶液的体积比为1:9；在30min时，乙腈和磷酸二氢钠水溶液的体积比为(7:3)～(9:1)。

作为本发明一种优选的技术方案，所述流速为30-50mL/min。。

有益效果：本发明提供了一种分离纯化杀鼠灵原药样品中未知杂质的方法，本发明通过对方法的合理设计，与现有的方法技术相比，具有明显的优点：分离杂质的精确度高、纯度高，杂质的专属性、线性及范围、回收率、精密度、耐用性等试验均良好；且流动相配制简单、检测成本低等。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为实施例1中鼠灵原药样品HPLC-MS预扫描的HPLC谱图。