[发明专利]一种同时检测烟叶中13种物质含量的方法

权利要求书

1.一种同时检测烟叶中13种物质含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)样品预处理：将烟叶冷冻干燥磨粉，得到预处理的烟叶；

(2)样品提取：取预处理的烟叶置于收集容器中，加入萃取剂，经过离心，收集上清液，二次提取，经滤膜过滤后的滤液作为样品溶液；

(3)用双柱串联-液相色谱-质谱法对样品进行分离检测；

(4)采用样品的峰面积和标准曲线进行定量分析，计算得到烟叶中13种物质含量；

其中，所述13种物质为：尼古丁(NT)、3-羟基可替宁(HC)、可替宁(CT)、降烟碱(NNT)、安那他品(AT)、假木贼碱(AB)、氨基酮[4-(甲基氨基)-1-(3-吡啶基)1-丁酮](AK)、6-羟基烟碱(6-HN)、2-羟基烟碱(2-HN)、N-亚硝基去甲基烟碱(NNN)、4-(N-甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亚硝基新烟草碱(NAT)、N-亚硝基假木贼碱(NAB)；

所述萃取剂包括甲酸铵、乙腈和水，重量体积比例为1.0-1.3g：1.0-1.2L：0.8-1.1L；

所述双柱串联-液相色谱-质谱法中，色谱条件为：

色谱柱：以Waters Xbridge Amide 3.5μm，2.1×100mm在前、Waters Atlantis T33μm，2.1×50mm在后的顺序进行串联；柱温：30℃；进样器温度：6℃；流速：0.6mL/min；进样量1～10μL；分离时间5.5min；流动相：A为100mM甲酸铵水溶液，B为乙腈；梯度洗脱条件为：第0～3min，5％～98％流动相B；第3～4min，98％流动相B；第4～4.1min，98％～5％流动相B；第4.1～5.5min，5％流动相B。

2.根据权利要求1所述的同时检测烟叶中13种物质含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，在-50～-80℃真空冷冻干燥1～3h，磨粉后过40目筛。

3.根据权利要求1所述的同时检测烟叶中13种物质含量的方法，其特征在于，所述双柱串联-液相色谱-质谱法中，质谱条件为：

ESI正离子电离模式；涡轮喷射电压4500eV；离子源温度500℃；气帘气10psi；碰撞气(CAD)12psi；雾化气(GS1)60psi，加热器气体(GS2)70psi；多反应监测(MRM)。

4.根据权利要求1所述的同时检测烟叶中13种物质含量的方法，其特征在于，步骤(2)中，采用孔径为0.45μm的PTFE膜进行过滤。