[发明专利]一种检测苹果汁中展青霉素的方法

权利要求书

1.一种检测苹果汁中展青霉素的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

将待测苹果汁与展青霉素同位素内标混匀，之后进行固液分离，得到含内标的澄清苹果汁；

利用季胺类高分子固相萃取柱对所述含内标的澄清苹果汁进行前处理，得到待测样品；配制含有所述展青霉素同位素内标的不同浓度的展青霉素标准工作液；包括：HyperSepRetain AX固相萃取柱先后加入3 mL甲醇和3 mL水进行活化，再加入2 mL含内标的澄清苹果汁，在重力作用下自然流出，之后依次用3 mL 0.1%体积分数的乙酸水溶液和纯水淋洗固相萃取柱，然后用真空泵将固相萃取柱抽干，最后用1 mL甲醇洗脱展青霉素，收集洗脱液氮气吹干后，用5%乙腈水溶液复溶，制成待测样品，用于后期的液质联用分析；

对所述待测样品以及不同浓度的所述展青霉素标准工作液进行UPLC-ID-MS/MS检测，其中，液相色谱的检测条件包括：色谱柱的种类为C₁₈，流动相中A相为水，B相为乙腈，流速为0.2-0.4 mL/min；所述A相与所述B相的体积比为95:5的等度洗脱；质谱采用电喷雾离子源负离子模式，所述质谱的检测条件包括：毛细管电压-2.5±0.25 KV，锥孔电压为10±1 V，源偏移电压30±3 V，源温度150±15℃；脱溶剂温度400±40℃，锥孔气流150±15 L/h，解吸附气流800±80 L/h，碰撞气流速为0.05±0.005 mL/min，碰撞能量为8±0.8，得到所述待测样品以及不同浓度的所述展青霉素标准工作液对应的质谱图；

根据不同浓度的所述展青霉素标准工作液对应的质谱图峰面积制作标准曲线；

根据所述标准曲线以及所述待测样品对应的质谱图峰面积，计算所述待测样品中展青霉素的含量，从而得到所述待测苹果汁中展青霉素的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为BEH C₁₈；液相色谱的检测条件还包括：所述色谱柱的温度为30-40℃。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，超高效液相色谱仪的样品室温度为4-10℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，质谱仪为三重四极杆质谱仪；所述三重四极杆质谱仪的m/z 153m/z 109通道为检测展青霉素的定量离子对，m/z 153m/z 81为检测展青霉素的定性离子对；m/z 160m/z 115为检测所述展青霉素同位素内标的定量离子对，而m/z 160m/z 86为检测所述展青霉素同位素内标的定性离子对。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准曲线的线性范围为1-400 ng/mL，检出限为0.2 ng/mL。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述展青霉素同位素内标为¹³C-展青霉素或氘代展青霉素。