[发明专利]适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法与应用

说明书

本发明公开了一种适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法与应用。所述驯化方法包括：将核型多角体病毒加水稀释10～20倍后施加于小叶黄杨枝叶上，获得含病毒饲料；先以苦参碱对黄杨绢野螟幼虫进行处理，之后以含病毒饲料来饲养饥饿的黄杨绢野螟幼虫，收集感毒虫或死亡虫，粉碎、过滤，将滤液离心后收集，除菌，获得驯化后的游离态核型多角体病毒；以其作为毒源，并重复前述步骤，增加驯化代次；对所获驯化后的游离态核型多角体病毒进行培养和扩增，获得核型多角体病毒。本发明的核型多角体病毒对黄杨绢野螟有较强的灭杀性，具有针对性强、防治时间长，且害虫难以产生抗药性的特点，并且本发明的方法驯化成功率高。

技术领域

本发明涉及一种核型多角体病毒的驯化与制备方法，尤其涉及一种适用于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化和工厂化生产方法及其应用，属于生物农药技术领域。

背景技术

黄杨绢野螟，Diaphania perspectalis(Walker)，属鳞翅目螟蛾科绢野螟属的一种昆虫，分布广泛。其主要危害黄杨科植物，如瓜子黄杨、雀舌黄杨、大叶黄杨、小叶黄杨、朝鲜黄杨以及冬青、卫矛等植物，其中又以瓜子黄杨和雀舌黄杨受害最重。以幼虫食害嫩芽和叶片，常吐丝缀合叶片，于其内取食，受害叶片枯焦，严重的街道被害株率50％以上，甚至可达90％，暴发时可将叶片吃光，造成黄杨成株枯死，影响市容，污染环境。

化学药物防治仍是控制该虫的重要应急措施，防治药物主要为有机磷农药，也有阿维菌素、BT乳剂的应用，但普遍面临抗药性增加、天敌受害严重、污染环境等问题，特别是面临世代重叠，很难做到彻底防治。

联合国粮农组织和世界卫生组织于1973年推荐昆虫杆状病毒用于农作物害虫的生物防治。昆虫病毒作为生物防治的重要手段之一，其优点在于特异性强、毒力高、稳定性好、安全无害，用后能引起害虫群体病毒疾病的流行传播，在相当长时间内可自然控制害虫消长，导致相继世代持续带毒，感染死亡。与其他化学农药和生物农药相比，昆虫病毒杀虫剂到目前未发现抗性问题，这为病毒杀虫剂的发展带来了良好的契机。目前广泛用于生物防治的主要是杆状病毒，尤其是核型多角体病毒。

目前的昆虫病毒来源主要是野外发现并采集，但这种方法既昂贵成本高，费时效率低，又不能适应现代环境虫情暴发与防控的需要。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法及应用，以克服现有技术的不足。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

本发明实施例提供了一种适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法，其包括：

1)提供核型多角体病毒，并加水稀释10～20倍并施加于小叶黄杨枝叶上，获得含病毒饲料；

2)先以苦参碱对黄杨绢野螟幼虫进行处理，再以所述含病毒饲料来饲养饥饿的黄杨绢野螟幼虫，之后收集感毒虫或死亡虫，粉碎、过滤，将滤液离心后收集，除菌，获得驯化后的游离态核型多角体病毒；

3)以所述驯化后的游离态核型多角体病毒作为毒源，并重复步骤1)～2)，增加驯化代次；

4)对步骤3)所获驯化后的游离态核型多角体病毒进行虫体培养和扩增，之后提纯，最终获得适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。

进一步地，所述核型多角体病毒包括苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒、茶尺蠖核型多角体病毒、斜纹夜蛾核型多角体病毒或甜菜夜蛾核型多角体病毒等，但不限于此。

进一步地，步骤3)中驯化代次为20～30代。

本发明实施例还提供了由前述驯化方法制得的适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。

本发明实施例还提供了一种生物农药，其有效成分包含前述的适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。