[发明专利]适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法与应用在审
| 申请号: | 202010057058.5 | 申请日: | 2020-01-19 |
| 公开(公告)号: | CN111117971A | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
| 发明(设计)人: | 孙祥明;滕小锘;袁秀丽;金亮 | 申请(专利权)人: | 苏州米迪生物技术有限公司;苏州市沃美生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A01N63/40;A01P7/04;C12R1/93 |
| 代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王茹;王锋 |
| 地址: | 215000 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 适应 黄杨 绢野螟 核型 多角体 病毒 驯化 方法 应用 | ||
1.一种适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法,其特征在于包括:
1)提供核型多角体病毒,并加水稀释10~20倍并施加于小叶黄杨枝叶上,获得含病毒饲料;
2)先以苦参碱对黄杨绢野螟幼虫进行处理,再以所述含病毒饲料来饲养饥饿的黄杨绢野螟幼虫,之后收集感毒虫或死亡虫,粉碎、过滤,将滤液离心后收集,除菌,获得驯化后的游离态核型多角体病毒;
3)以所述驯化后的游离态核型多角体病毒作为毒源,并重复步骤1)~2),增加驯化代次;
4)对步骤3)所获驯化后的游离态核型多角体病毒进行虫体培养和扩增,之后提纯,最终获得适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。
2.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于,步骤1)包括:将核型多角体病毒农药用无菌水稀释后浸泡小叶黄杨枝叶。
3.根据权利要求2所述的驯化方法,其特征在于:所述核型多角体病毒农药与无菌水的体积比为1:10~20。
4.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于:所述核型多角体病毒包括苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒、茶尺蠖核型多角体病毒、斜纹夜蛾核型多角体病毒或甜菜夜蛾核型多角体病毒。
5.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于,步骤2)包括:将黄杨绢野螟的卵置于气候培养箱中孵化并群体饲养,并挑选出3~4龄的黄杨绢野螟幼虫,其中,所述气候培养箱的培养条件包括:温度为25.5~26.5℃,湿度55~65%,光照时长与黑暗时长的比例为14~12:10~12。
6.根据权利要求5所述的驯化方法,其特征在于,步骤2)包括:将所述3~4龄的经过苦参碱处理的黄杨绢野螟幼虫饥饿12~24小时,先喂食所述含病毒饲料,再喂食正常的小叶黄杨枝叶,之后观察,收集感毒虫或死亡虫。
7.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于,步骤3)中驯化代次为20~30代。
8.由权利要求1-7中任一项所述驯化方法制得的适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。
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