[发明专利]适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法与应用在审

专利信息
申请号: 202010057058.5 申请日: 2020-01-19
公开(公告)号: CN111117971A 公开(公告)日: 2020-05-08
发明(设计)人: 孙祥明;滕小锘;袁秀丽;金亮 申请(专利权)人: 苏州米迪生物技术有限公司;苏州市沃美生物技术有限公司
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;A01N63/40;A01P7/04;C12R1/93
代理公司: 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 代理人: 王茹;王锋
地址: 215000 江苏省苏州市苏州工*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 适应 黄杨 绢野螟 核型 多角体 病毒 驯化 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒的驯化方法,其特征在于包括:

1)提供核型多角体病毒,并加水稀释10~20倍并施加于小叶黄杨枝叶上,获得含病毒饲料;

2)先以苦参碱对黄杨绢野螟幼虫进行处理,再以所述含病毒饲料来饲养饥饿的黄杨绢野螟幼虫,之后收集感毒虫或死亡虫,粉碎、过滤,将滤液离心后收集,除菌,获得驯化后的游离态核型多角体病毒;

3)以所述驯化后的游离态核型多角体病毒作为毒源,并重复步骤1)~2),增加驯化代次;

4)对步骤3)所获驯化后的游离态核型多角体病毒进行虫体培养和扩增,之后提纯,最终获得适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。

2.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于,步骤1)包括:将核型多角体病毒农药用无菌水稀释后浸泡小叶黄杨枝叶。

3.根据权利要求2所述的驯化方法,其特征在于:所述核型多角体病毒农药与无菌水的体积比为1:10~20。

4.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于:所述核型多角体病毒包括苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒、茶尺蠖核型多角体病毒、斜纹夜蛾核型多角体病毒或甜菜夜蛾核型多角体病毒。

5.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于,步骤2)包括:将黄杨绢野螟的卵置于气候培养箱中孵化并群体饲养,并挑选出3~4龄的黄杨绢野螟幼虫,其中,所述气候培养箱的培养条件包括:温度为25.5~26.5℃,湿度55~65%,光照时长与黑暗时长的比例为14~12:10~12。

6.根据权利要求5所述的驯化方法,其特征在于,步骤2)包括:将所述3~4龄的经过苦参碱处理的黄杨绢野螟幼虫饥饿12~24小时,先喂食所述含病毒饲料,再喂食正常的小叶黄杨枝叶,之后观察,收集感毒虫或死亡虫。

7.根据权利要求1所述的驯化方法,其特征在于,步骤3)中驯化代次为20~30代。

8.由权利要求1-7中任一项所述驯化方法制得的适应于黄杨绢野螟的核型多角体病毒。

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