[发明专利]一种切伦科夫荧光成像探针及其制备方法与应用在审
申请号: | 202010044384.2 | 申请日: | 2020-01-15 |
公开(公告)号: | CN111378042A | 公开(公告)日: | 2020-07-07 |
发明(设计)人: | 姜慧杰;赵升;潘文斌;蔺雪 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨医科大学 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28;C07K1/13;C09K11/04;C09K11/06;G01N33/68;G01N33/574 |
代理公司: | 成都东恒知盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51304 | 代理人: | 何健雄;廖祥文 |
地址: | 150081 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 切伦科夫 荧光 成像 探针 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种切伦科夫荧光成像探针,其特征在于,所述探针为131I-PD-L1 mAb,其化学式为:
2.一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
步骤a、将摩尔比为87:13的Na2HPO4·12H2O与NaH2PO4·2H2O用ddH2O配置为磷酸盐缓冲液,调节pH值至7.6;
步骤b、将酪氨酸溶解于步骤a得到的磷酸盐缓冲液,配置成10mg/ml的酪氨酸磷酸盐溶液;
步骤c、将0.2mol/L的磷酸盐缓冲液加入到氧化剂涂布的微型离心管内,再加入抗PD-L1单克隆抗体,混匀后,加入Na131I再次混匀,室温反应10-15min,期间每隔3min混匀一次;
步骤d、反应完成后加入酪氨酸磷酸溶液终止反应,室温静置10min;
步骤e、纯化:20mmol/L的磷酸盐缓冲液内加入含有复合氨基酸的蛋白作为蛋白质保护剂,混匀后调节pH到7.4,配置成0.3%牛血清白蛋白-磷酸盐洗脱液,反应所得产物加入PD-10预装脱盐柱纯化,0.5ml每等试样进行等分,测定每份的放射性计数,合并放射性计数高的峰管,得到131I-PD-L1 mAb。
3.根据权利要求2所述的一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,所述步骤c中混匀是通过涡旋振荡器进行的。
4.根据权利要求2或3所述的一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,所述氧化剂为1,3,4,6-四氯-3α,6α-二苯基甘脲,所述氧化剂具体须通过以下方式得到:用二氯甲烷溶解氧化剂后,使二氯甲烷溶剂挥发干,保持干燥,放入-20℃冰箱内保存备用。
5.根据权利要求2-4任一所述的一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,所述131I-PD-L1 mAb得到后须保存在真空瓶内,置于铅罐内,放于4℃冰箱内保存。
6.根据权利要求2-5任一所述的一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,所述步骤e中0.5ml每等试样进行等分的份数为20-30份。
7.根据权利要求2-6任一所述的一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,所述含有复合氨基酸的蛋白为牛血清白蛋白。
8.根据权利要求2-7任一所述的一种切伦科夫荧光成像探针的制备方法,其特征在于,所述抗体与氧化剂的质量比为1:1。
9.一种切伦科夫荧光成像探针可用于检测结直肠癌PD-L1表达水平的试剂盒方面的应用。
10.一种切伦科夫荧光成像探针可用于检测结直肠癌PD-L1表达水平的显影剂方面的应用。
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