[发明专利]一种利用莲藕提取物一步法制备高效、稳定复合纳米银抑菌剂的方法

说明书

本发明涉及新型抑菌剂制备领域，特别涉及一种生物介导的复合纳米银抑菌剂的制备方法。包括以下步骤：1)、将莲藕洗净，切片，烘干至恒重后得到干燥的藕片；2)、将干燥的藕片捣碎研磨成粉末后与提取剂按照质量比1∶(1‑100)的比例混合，100‑500W微波处理5‑10min，加热回流，离心，取上清液，放于4℃备用；3)、称量0.1‑3g的壳聚糖，加入到100mL 1％的冰酸溶液中，持续搅拌过夜，使壳聚糖完全溶解，备用；4)、取上述1‑10mL的壳聚糖溶液，至30mL双蒸水中，再加入一定体积的硝酸银溶液，持续搅拌5min，随后加入莲藕提取液0.1‑10mL，定容至50mL，加热回流，即得到复合纳米银抑菌剂。本发明充分发挥了生物纳米银和壳聚糖的协同抑菌作用，达到显著的抑菌效果，并且以壳聚糖为载体制备出的复合生物纳米银制剂将更加稳定。

技术领域

本发明涉及新型抑菌剂制备领域，特别涉及一种生物介导的复合纳米银抑菌剂的制备方法。

背景技术

莲藕(Nulumbo nucifera Gaertn.)属木兰科多年水生草本植物。其根状茎既可生食也可加热煮食，是被广泛食用的蔬菜之一。除了食用之外，莲藕同时还具有清热生津、开胃健脾、止血化瘀、益血补心、止泻、降血压、降血糖等药用价值。现代科学研究发现莲藕中富含儿茶素、儿茶酚、没食子酚、多巴、芦丁、绿原酸、咖啡酸等多酚类物质，另外还含有有机酸、鞣质、多糖、皂苷、维生素C等，能有效清除氧自由基，具有抗氧化、抗衰老的功效。因此，莲藕的抗氧化能力强，是提取抗氧化剂的优良原料。

壳聚糖是甲壳素N-脱乙酰基的产物，具有成膜性、生物降解性、生物相容性、安全无毒，壳聚糖表面具有丰富的氨基和羧基，为制备复合材料提供了结合位点。同时壳聚糖还是天然抑菌剂，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、假单胞菌等细菌以及白色念珠菌薄状菌属、脉孢菌属、座线孢菌属等真菌均具有良好的抑制作用。然而壳聚糖的抑菌能力比较温和，大大限制了壳聚糖在抗菌方面的应用。

纳米银是将粒径做到纳米级的金属银单质。随着纳米技术的兴起，纳米银以其巨大的比表面积和小尺寸效应、以及独特的抑菌机理和良好的抑菌性能已成为一种新型的抑菌剂，在化工、纺织、陶瓷、生命科学、医学抑菌领域得到广泛应用。目前纳米银的制备方法主要有化学合成法、物理合成法以及生物合成法三大类。其中，物理法和化学法对合成设备要求较高、在实验过程中往往需要加入对环境造成危害的化学试剂，并且合成的纳米银颗粒表面活性很高，容易发生团聚，导致抑菌功能丧失，不利于长期保存。生物合成法以生物自身蕴含的还原剂制备纳米银，与其他传统合成方法相比具有成本低廉、环境友好、抗菌广谱高效等优点，能充分利用生物资源，易于放大，适合大规模工业化生产，并且符合现代科技低成本、低耗能、绿色环保发展的理念。虽然目前已有不少利用植物、微生物提取物生物合成纳米银的报道，但研究发现不同生物材料制备的纳米银抑菌剂在理化性质、抑菌活性和抑菌谱等方面都存在着较大的差别。另外，生物提取物中的氨基酸、脂类、蛋白质、多糖等物质虽然在一定程度上能起到稳定纳米银的作用，但许多生物合成纳米银产品在长期放置过程中仍会有团聚现象发生，不利于纳米银的推广和应用。因此需要人们不断开发和利用新的生物材料，用以制备出更加高效、稳定的纳米银抑菌剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用莲藕提取液生物合成的纳米银复合抑菌剂的方法，该方法反应条件温和环保，简单易操作，充分发挥了纳米银和壳聚糖的协同抑菌作用，达到显著的抑菌效果，并且以壳聚糖为载体制备出的复合纳米银制剂将更加稳定。

一种利用莲藕提取物一步法制备高效、稳定复合纳米银抑菌剂的方法，其特殊之处在于包括以下步骤：

1、材料的预处理

将莲藕洗净，切片，烘干至恒重后得到干燥的藕片；

所述将莲藕洗净是先将莲藕用自来水冲洗干净后，再用双蒸水洗涤3-5次；

所述藕片置于烘箱中烘干至恒重，烘箱内的温度控制在50-80℃；

2、莲藕提取液的制备