[发明专利]基于CoOOH-TMB氧化系统的比色方法用于检测谷胱甘肽

说明书

本公开涉及一种基于CoOOH‑TMB氧化系统的比色方法检测谷胱甘肽的方法及其试剂盒，检测GSH的方法包括以下步骤：将待测样品与羟基氧化钴纳米片溶液混合后进行孵育，获得混合溶液一；向混合溶液一中加入醋酸‑醋酸盐缓冲溶液和四甲基联苯胺溶液，混合均匀，获得混合溶液二；测定混合溶液二的吸光度，即可测定GSH的含量。该方法和试剂盒灵敏度高、特异性好，操作简单方便，成本低廉。

技术领域

本公开涉及基于CoOOH-TMB氧化系统的比色方法用于检测谷胱甘肽，属于生物和分析化学领域。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

谷胱甘肽是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，存在于几乎身体的每一个细胞，谷胱甘肽有还原型(GSH)和氧化型(GSSG)两种形式，在生理条件下以还原型谷胱甘肽占绝大多数。谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统功能，并具有抗氧化作用、整合解毒作用。谷胱甘肽不仅可用于药物，更可作为功能性食品的基料，在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。因此，对于检测谷胱甘肽的含量具有多方面的重要意义。

对于谷胱甘肽的检测方法，目前比较常用的方法包括：荧光法、高效液相色谱法(HPLC)、表面增强拉曼光谱法(SERS)、高效毛细管电泳法(HPCE)、酶联免疫吸附测定(ELISA)法等。这些已建立的方法在定量检测谷胱甘肽中虽然具有一定的优势，然而这些检测方法需要昂贵的仪器，操作步骤繁琐费时，成本较高，且需要专业的人员操作。

因此，目前仍需研发更加简便和成本低廉等的谷胱甘肽检测试剂盒和检测方法，以便更适合于科学研究以及日常检测的应用。

发明内容

针对以上背景技术，应用于化学药、生物制品、中药和医疗器械等不同类型的创新产品，以获得上市许可为目标的临床前研究、临床试验的委托合同研究(CRO)。主要用于医用检查检验仪器及服务中的体外诊断检测，本公开提出一种基于CoOOH-TMB氧化系统的比色方法检测谷胱甘肽的方法，该方法灵敏度高、特异性好，操作简单方便，成本低廉。

具体的，本公开采用以下技术方案：

本公开的第一个目的，提供一种检测GSH的试剂盒，该试剂盒包括：

羟基氧化钴(CoOOH)纳米片溶液或配置羟基氧化钴(CoOOH)纳米片溶液的物质；

醋酸-醋酸盐缓冲溶液或配制醋酸-醋酸盐缓冲溶液的缓冲物质；和，

四甲基联苯胺。

本公开的第二个目的，提供一种检测GSSG试剂盒，该试剂盒包括：

GSH掩蔽剂；

GSSG碱性还原剂；

所述GSSG碱性还原剂的中和试剂；

羟基氧化钴(CoOOH)纳米片溶液或配置羟基氧化钴(CoOOH)纳米片溶液的物质；

醋酸-醋酸盐缓冲溶液或配制醋酸-醋酸盐缓冲溶液的缓冲物质；和，

四甲基联苯胺(TMB)。

在本公开的第三个目的，提供一种检测GSH的方法，该方法包括以下步骤：

将待测样品与羟基氧化钴纳米片溶液混合后进行孵育，获得混合溶液一；

向混合溶液一中加入醋酸-醋酸盐缓冲溶液和四甲基联苯胺溶液，混合均匀，获得混合溶液二；

测定混合溶液二的吸光度，即可测定GSH的含量。