[发明专利]一种新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法在审
申请号: | 202010026672.5 | 申请日: | 2020-01-10 |
公开(公告)号: | CN111272888A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 冯振;景叶松;弭兆元 | 申请(专利权)人: | 山东英盛生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 张晓鹏 |
地址: | 250101 山东省济南市高新区大正路1*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新生儿 片中 氨基酸 肉碱 预处理 方法 | ||
1.一种新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:预处理方法为将血液样品自然晾干制成干血斑,将干血斑利用试剂盒进行提取,然后取上清液放入96孔板过滤板内利用96孔板离心机进行过滤,96孔板的内部放置聚四氟乙烯薄膜。
2.根据权利要求1所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:96孔板过滤机的转速为小于等于3000r/min。
3.根据权利要求1所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:96孔板过滤机的离心力是1100-1200g。
4.根据权利要求1所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:聚四氟乙烯薄膜的孔径为0.22-0.45μm。
5.根据权利要求1所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:96孔板中的每个容积为400-450μL。
6.根据权利要求1所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:利用试剂盒进行提取的具体步骤为:
利用打孔器将干血斑移入U-型底96孔微孔板内,每孔加入内标工作溶液,覆上封膜,振荡孵育,揭下封膜,将每孔内的溶液转移至对应的V-型底96孔耐热微孔板内,覆上封膜。
7.根据权利要求6所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:内标工作溶液为含有氨基酸内标和肉碱内标的萃取液,稀释比例为氨基酸内标浓缩液:肉碱内标浓缩液:萃取液=1:1:196-200。
8.根据权利要求6所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:振荡孵育的温度为28-32℃,振荡的频率为600-800rpm,振荡孵育的时间为40-45min。
9.根据权利要求1所述的新生儿血片中氨基酸及肉碱筛查预处理方法,其特征在于:离心的过程为:96孔板过滤板与V-型底96孔耐热微孔板叠放设置,96孔板过滤板过滤后的过滤液进入V-型底96孔耐热微孔板。
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