[发明专利]一株硝化细菌及其应用

说明书

本发明为具体涉及一株高效硝化菌Bacillus toyonensis TNH01及其应用。其中细胞保藏：本发明的一株高效硝化细菌Bacillus toyonensis TNH01是发明人自行筛选得到的，其保藏号：CCTCC NO:2019737，保藏日期：2019年9月23日，保藏单位为CCTCC。该高效硝化细菌的应用，是在养殖废水去除氨氮中的应用。该菌可有效去除养殖水体中的氨态氮，显著改善水质。

技术领域

本发明涉及微生物及环境科学技术领域，具体涉及一株硝化菌Bacillussp.TNH01及其应用。

背景技术

水体富营养化是指湖泊、河流、水库等水体中氮磷等植物营养物质含量过多所引起的整个水体生态平衡改变一种污染现象，它已成为我国水环境污染、水体生态功能退化的最主要原因之一。水体富营养化的根本原因是营养物质的增加，主要是氮、磷及其它养分元素的输入，其中氮是最严重的污染物质。集约化生产在提高经济效益的同时也带来新的问题，如养殖污水排放量剧增等一系列环境问题。

目前，国内外养殖水质净化的方法一般采用物理法、化学法或者生物法，但是这些方法存在很多弊端。比如物理方法耗时耗力，成本较高；化学水质改良剂会对环境产生二次污染，有的还会对人体造成伤害，现在己被禁止使用。近年来，微生物因其生长繁殖快、比面值大、吸收转化快、适应性强以及种类多、分布广等优势被广泛应用。相对于传统的物理和化学方法而言，微生态技术具有成本低、收效大、无二次污染等优点，是当前研究热点。水处理中氮素的传统生物脱除主要通过硝化和反硝化两个过程来完成，即氨氮由自养的硝化细菌在好氧条件下转化为硝态氮，然后再通过异养的反硝化细菌在缺氧条件下将硝态氮还原为氮气，排出水体。但养殖水体氨氮的生物转化仍需深入研究，关键在于筛选具有高效降解效果、耐高温、耐盐范围广，且易于培养、生长周期短的菌种。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种硝化细菌Bacillus sp.TNH01。

本发明的第二个目的是提供一种硝化细菌Bacillus sp.TNH01的应用，用于养殖废水去除氨氮。

其中细胞保藏：本发明的一株硝化细菌Bacillus sp.TNH01是发明人自行筛选得到的，其保藏号：CCTCC NO:M 2019737，保藏日期：2019年9月23日，保藏单位为CCTCC，地址位于湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内。

本发明的硝化细菌Bacillus sp.TNH01菌株在营养琼脂平板上菌落近圆形、淡黄色、边缘不整齐、表面湿润粗糙、稍突起、不透明，菌落直径为0.5-3.5mm。在LB液体培养基中呈均匀混浊，菌株数量可高达10⁸cfu/g以上。菌株TNH01在好氧条件下，在24h内可去除100mg/L氨氨。

本发明的优点：1、培养方便，生长速度快；2、培养发酵后的活菌菌株数目高；3、该菌可有效去除养殖水体中的氨态氮，显著改善水质。

具体实施方式

实施例一、TNH01的获得：

1.菌的分离纯化：

取竹林土壤10g，加100ml模拟污水：0.27g NH₄CL，2.7g丁二酸钠，5ml维氏盐溶液(K2HP045g/L、MgS04 2.5g/L、NaC12.5g/L、FeSO4.7H200.05g/L、MnSO4.4H200.05g/L，余量为去离子水)。每24h取样点样分析，定性检测氨氮的降解情况。当氨氮完全降解，取微量进行分离纯化。

氨氮的定性检测：用钠氏试剂点样，若出现黄色反应，说明培养液中存在氨氮，且颜色越深浓度越大。

2.菌的分离纯化：