[发明专利]子宫内膜干细胞的定向成软骨分化培养

权利要求书

1.一种子宫内膜干细胞的定向成软骨分化培养方法，其特征在于：

使用(2Z,5E)-7-羟基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖苷进行诱导培养，(2Z,5E)-7-羟基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖苷甲酯结构如下：

2.权利要求1所述的培养方法，其特征在于：

成软骨诱导液配方：DMEM低糖培养基+10％FBS+10-20μg/mL(2Z,5E)-7-羟基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖苷+50μg/mL抗坏血酸。

3.权利要求2所述的培养方法，其特征在于步骤如下：

(1)hEMSCs的原代培养：

(2)对hEMSCs进行传代、纯化、冻存及复苏；复苏后上流式细胞仪检测细胞表面特异性抗原阳性率，鉴定确认为hEMSCs。

(3)诱导培养。

4.权利要求3所述的培养方法，其特征在于：

诱导培养步骤如下：

(1)选用复苏鉴定后的hEMSCs，首先用斯丹赛品牌的人类胚胎干细胞条件培养液培养液培养中1d；

(2)使用成软骨诱导液进行诱导培养6-8d，所述成软骨诱导液配方：成软骨诱导液配方：DMEM低糖培养基+10％FBS+(2Z,5E)-7-羟基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖苷+50μg/mL抗坏血酸。

5.权利要求4所述的培养方法，其特征在于：

成软骨诱导液配方：DMEM低糖培养基+10％FBS+10-20μg/mL(2Z,5E)-7-羟基-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖苷+50μg/mL抗坏血酸。