[发明专利]环异麦芽四糖、环异麦芽四糖生成酶和它们的制造方法以及用途

权利要求书

1.一种环异麦芽四糖，其具有四分子的D-葡萄糖介由α-1,6糖苷键以环状连接的结构。

2.一种权利要求1所述的环异麦芽四糖的结晶。

3.如权利要求2所述的环异麦芽四糖的结晶，其呈五水结晶的形态。

4.如权利要求3所述的呈五水结晶的形态的环异麦芽四糖的结晶，其中，在粉末X射线衍射图中，在衍射角(2θ)9.0°、9.8°、11.8°、13.1°和19.1°处具有特征衍射峰。

5.一种含环异麦芽四糖的糖类，其包含权利要求1所述的环异麦芽四糖和/或权利要求2所述的环异麦芽四糖的结晶以及其他糖类。

6.如权利要求5所述的含环异麦芽四糖的糖类，其形态为糖浆、粉末、含结晶的粉末或固体中的任一种。

7.一种环异麦芽四糖的葡糖基衍生物，其具有一分子或两分子的D-葡萄糖键合于环异麦芽四糖的结构。

8.一种环异麦芽四糖生成酶，其具有作用于葡萄糖聚合度为4以上的α-1,6葡聚糖、右旋糖酐或右旋糖酐的部分分解物并生成权利要求1所述的环异麦芽四糖的作用。

9.如权利要求8所述的环异麦芽四糖生成酶，其具有下述物理化学性质，

(1)分子量

在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中，为86,000±10,000道尔顿；

(2)最适温度

在pH6.0、反应30分钟的条件下，为35℃至40℃；

(3)最适pH

在40℃、反应30分钟的条件下，为5.5至6.0；

(4)温度稳定性

在pH6.0、保持30分钟的条件下，至40℃稳定；

(5)pH稳定性

在4℃、保持16小时的条件下，在pH为5.0至10.0稳定。

10.如权利要求8或9所述的环异麦芽四糖生成酶，其具有序列表中的序列编号5或6所示的氨基酸序列作为N末端氨基酸序列。

11.如权利要求8至10中任一项所述的环异麦芽四糖生成酶，其具有：序列表中的序列编号7或8所示的氨基酸序列；或者在保持其酶活性的范围内，序列表中的序列编号7或8所示的氨基酸序列中缺失、取代或添加一个或两个以上的氨基酸而得到的氨基酸序列。

12.如权利要求11所述的环异麦芽四糖生成酶，其具有如下氨基酸序列：相对于序列表中的序列编号7或8所示的氨基酸序列而言，具有70％以上的同源性。

13.如权利要求8至12中任一项所述的环异麦芽四糖生成酶，其为源于微生物的酶。

14.如权利要求13所述的环异麦芽四糖生成酶，其中，所述微生物为属于阿格雷氏(Agreia)属的微生物或属于微杆菌(Microbacterium)属的微生物。

15.如权利要求14所述的环异麦芽四糖生成酶，其中，所述属于阿格雷氏(Agreia)属的微生物是阿格雷氏菌种(Agreia sp.)D1110(独立行政法人制品评价技术基础机构专利微生物保藏中心，保藏号NITE BP-02815)或其变异菌株，所述属于微杆菌(Microbacterium)属的微生物是解单端孢菌素微杆菌(Microbacterium trichothecenolyticum)D2006(独立行政法人制品评价技术基础机构专利微生物保藏中心，保藏号NITE BP-02816)或其变异菌株。