[发明专利]截短的多价多元体

权利要求书

1.一种多价多元体，包括三个或更多个结合域并且包括具有N末端和C末端的两个或更多个重链区，其中所述多元体包括使所述重链区中的两个在所述C末端处配对的铰链区。

2.根据权利要求1所述的多价多元体，包括三个或更多个人类重链可变区，其中两个在所述铰链区处配对，其中所述配对包括一个或多个二硫桥键。

3.根据权利要求1或2所述的多价多元体，其中每个重链区包括CH1域。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的多价多元体，其中两个或更多个重链区包括共同可变区。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的多价多元体，其中所述两个或更多个重链区与人类轻链区配对，其中所述轻链区是共同轻链。

6.根据权利要求5所述的多价多元体，其中所述共同轻链包括CL域。

7.根据权利要求5或6所述的多价多元体，其中所述共同轻链包括SEQ ID NO：1的序列。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的多价多元体，其中所述多元体包括三个Fab域(Fab1、Fab2、Fab3)，其各自包括与含可变区(VL)和恒定区(CL)的轻链配对的含可变区(VH)和恒定区(CH1)的重链，其中Fab2与Fab3经由在Fab2的重链可变区和Fab3的CH1域处的连接子连接，并且其中所述Fab1和Fab3经由铰链配对，所述铰链包括在Fab1的重链和Fab3的重链的C末端处存在的至少两个二硫键。

9.根据权利要求8所述的多价多元体，其中连接Fab2与Fab3的所述连接子包括SEQ IDNO：2-25的序列或与所述SEQ ID No：2-25具有至少约85％同一性的多肽。

10.根据权利要求8至9中任一项所述的多价多元体，其中所述连接子的氨基酸序列包括天然存在的序列或包括来源于天然存在的序列的序列。

11.根据权利要求10所述的多价多元体，其中所述连接子包括中间铰链区序列。

12.根据权利要求10所述的多价多元体，其中所述连接子包括上部铰链序列和下部铰链序列。

13.根据权利要求10所述的多价多元体，其中所述连接子包括螺旋形成序列。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的多价多元体，其中所述两个或更多个重链区的可变区特异性结合不同的表位。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的多价多元体，其中所述多元体结合至少两种不同抗原。

16.一种制造多价多元体的方法，包括：

用两种或更多种抗原对转基因动物免疫接种，所述转基因动物包括编码共同轻链可变区和未经重排的重链可变区的核酸；

获得一组特异性结合所述两种或更多种抗原的抗体，所述抗体包括所述共同轻链可变区和经重排的重链抗体链；

将核酸整合至宿主细胞中，所述核酸编码所述共同轻链可变区以及两个或更多个经重排的重链，其特异性结合所述两种或更多种抗原，其中所述经重排的重链中的两个包括恒定区，所述恒定区包括能够经由形成二硫桥键配对的CH1、CH2和/或CH3域；

在使包括所述共同轻链以及两个或更多个经重排的重链的完整多价多元体表达的条件下培养所述宿主细胞，其中所述经重排的重链中的两个经由在所述两个经重排的重链各自的CH1与CH2域之间的二硫桥键配对；以及

用裂解出所述两个经重排的重链各自的CH2和/或CH3区的酶处理所述完整多价多元体，维持所述两个经重排的重链经由二硫桥键进行的配对以形成所述多价多元体。