[发明专利]用于筛选酶或微生物的基于纳米粒子的方法

权利要求书

1.一种纳米粒子，其包含不溶于水的聚合物基质和一种或多种指示剂成分，其中仅当该聚合物基质被降解或破坏时才从该纳米粒子中释放该一种或多种指示剂成分，优选地，其中该指示剂成分被包封在该不溶于水的聚合物基质中，更优选地，该不溶于水的聚合物基质的质量浓度为50％-99.99％，优选90％-99.99％，例如95％-99.99％，并且该指示剂成分的质量浓度为0.01％-50％，优选0.01％-10％，例如0.01％-5％。

2.根据权利要求1所述的纳米粒子，当该不溶于水的聚合物基质被降解或破坏时，可以从其中释放该指示剂成分，然后触发或增强指示效果。

3.根据权利要求1所述的纳米粒子，其中该不溶于水的聚合物基质包含酶底物或由其组成，优选地，该不溶于水的聚合物选自聚酯、淀粉、糖类、脂类、木质素、蛋白质、核酸、直链淀粉、纤维素、果胶、几丁质、脂肪酸、木质素、海藻酸、透明质酸、琼脂、甘露聚糖、黄原胶、阿拉伯胶、蛋白质、DNA或RNA，优选地，该聚酯是例如聚对苯二甲酸丁二酯(PBT)、聚对苯二甲酸丙二酯(PTT)、聚对苯二甲酸乙二酯(PEN)、聚对苯二甲酸乙二酯、四亚甲基对苯二甲酸酯(PTMT)、聚乙烯-4-氧基苯甲酸酯、聚乙二醇、聚氯乙烯、聚乙醇酸、聚乳酸、聚酐、聚己内酯、聚丙烯腈、聚丙烯、聚乙烯醇。

4.根据权利要求1所述的纳米粒子，其中该指示剂成分是荧光指示剂或生色指示剂，例如，具有酶底物、优选荧光或生色酶底物的荧光或生色指示剂缀合物，其中特定酶的活性将该荧光或生色酶底物转化为指示化合物，例如荧光素。

5.根据权利要求1所述的纳米粒子，其中该聚合物基质和指示剂成分均具有相似或相同的酶水解基团，优选地，该聚合物基质和指示剂成分均可以被特定活性酶降解或水解，然后触发或增强指示效果，例如荧光指示效果。

6.一种微反应物，其包含根据权利要求1-5中任一项所述的纳米粒子和至少一种生物活性物质，优选地，该微反应物呈水相形式，例如呈可以分散在油相中的水滴形式或呈可以分散在水相中的油水滴形式。

7.根据权利要求6所述的微反应物，其平均直径为约1至200微米、优选2至100微米、更优选10至50微米、更优选10至30微米，例如15至25微米。

8.根据权利要求6所述的微反应物，其中该生物活性物质是不溶于水的聚合物降解酶或不溶于水的聚合物降解微生物，优选地，该不溶于水的聚合物降解微生物能够表达不溶于水的聚合物降解酶或能够表达不溶于水的聚合物降解酶的增强子，任选地，该不溶于水的聚合物降解微生物是天然细胞或重组细胞，优选包含目的酶的多核苷酸。

9.根据权利要求8所述的微反应物，其中不溶于水的聚合物降解酶是水解酶、异构酶、连接酶、裂解酶、氧化还原酶或转移酶，优选地是α-半乳糖苷酶、α-葡糖苷酶、氨肽酶、淀粉酶、天冬酰胺酶、β-半乳糖苷酶、β-葡糖苷酶、β-木糖苷酶、糖酶、羧肽酶、过氧化氢酶、纤维二糖水解酶、纤维素酶、几丁质酶、角质酶、脂肪分解酶、过氧化物酶、环化酶、环糊精糖基转移酶、脱氧核糖核酸酶、内切葡聚糖酶、酯酶、葡聚糖转移酶、葡糖淀粉酶、转化酶、漆酶、脂肪酶、甘露糖苷酶、变位酶、氧化酶、果胶裂解酶、过氧化物酶、植酸酶、多酚氧化酶、蛋白水解酶、核糖核酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖酶、PET降解酶或辣根过氧化物酶。

10.一种试剂盒，其包含根据权利要求1至5中任一项所述的纳米粒子或根据权利要求6至9中任一项所述的微反应物。