[发明专利]使用转化的T细胞培养脐带血来源的自然杀伤细胞的方法在审
| 申请号： | 201980075094.X | 申请日： | 2019-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN113383069A | 公开（公告）日： | 2021-09-10 |
| 发明（设计）人： | 金宥善;金恩智;朴劲珉;B·杨;闵普庆;赵诚唯;黄琉炅 | 申请（专利权）人： | GC细胞治疗 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 陈桉 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 使用 转化 细胞培养 脐带血 来源 自然 杀伤 细胞 方法 | ||
1.一种培养自然杀伤细胞的方法，其包括共培养转化的CD4+T细胞和种子细胞。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述转化的CD4+T细胞表达选自4-1BBL、mbIL-21、OX40L和mTNF-α基因的至少一种基因。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述4-1BBL基因具有编码SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述编码核苷酸序列显示于SEQ ID NO:2中。
5.根据权利要求2所述的方法，其中所述mbIL-21基因具有编码SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述编码核苷酸序列显示于SEQ ID NO:4中。
7.根据权利要求2所述的方法，其中所述OX40L基因具有编码SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的核苷酸序列。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述编码核苷酸序列显示于SEQ ID NO:6中。
9.根据权利要求2所述的方法，其中所述mTNF-α基因具有编码SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列的核苷酸序列。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述编码核苷酸序列显示于由SEQ ID NO:9表示。
11.根据权利要求2所述的方法，其中所述基因是通过重组慢病毒进行转导。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述CD4+T细胞表达所述4-1BBL或mbIL-21基因。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述CD4+T细胞表达所述4-1BBL和mbIL-21基因。
14.根据权利要求1所述的方法，其中所述CD4+T细胞表达所述4-1BBL、mbIL-21和mTNF-α基因。
15.根据权利要求1所述的方法，其中所述CD4+T细胞表达所述4-1BBL、mbIL-21、OX40L和mTNF-α基因。
16.根据权利要求1所述的方法，其中所述CD4+T细胞选自Hut78、H9、Jurkat、Loucy、Molt-3、Molt-13、Peer、RPMI8402和TALL-01细胞。
17.根据权利要求1所述的方法，其中所述种子细胞是脐带血来源的单核细胞。
18.根据权利要求1所述的方法，其中所述种子细胞是其中CD3(+)细胞被消除的细胞。
19.根据权利要求1所述的方法，其中所述转化的CD4+T细胞和所述种子细胞是以0.1:1至50:1的比率混合。
20.根据权利要求1所述的方法，其中所述种子细胞与饲养细胞混合仅一次持续5至60天，或者混合两次或更多次持续至少60天。
21.根据权利要求1所述的方法，其中在补充有抗CD3抗体和白介素蛋白的培养基中培养自然杀伤细胞。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所述抗CD3抗体选自OKT-3、UCHT1和HIT3a。
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