[发明专利]用于增强癌症免疫疗法的与免疫检查点抑制剂复合的树枝状聚合物

说明书

本文描述了一种纳米颗粒系统，其包括多价纳米颗粒核心，所述多价纳米颗粒核心包含与之缀合的多个免疫检查点抑制剂。还包括药物组合物和制备所述纳米颗粒系统的方法。还包括免疫治疗方法，所述方法包括将所述纳米颗粒系统施用于需要其的受试者，例如人类癌症患者。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年10月29日提交的美国临时申请62/751,831的优先权，其全部内容通过引用的方式并入本文。

技术领域

本公开涉及用免疫检查点抑制剂进行癌症免疫疗法的组合物和方法。

背景技术

肿瘤细胞通过触发免疫检查点调节剂(例如PD-1/PD-L1或CTLA-4/B7)具有免疫逃逸机制。这些相互作用表现出免疫抑制行为，这导致细胞毒性T淋巴细胞凋亡，抑制免疫系统中细胞因子信号分子的释放，并增加免疫功能障碍。这些结果共同促进了肿瘤内微血管的形成和肿瘤细胞的更高的化学抗性。因此，抑制免疫检查点调节剂可以恢复抗原特异性T细胞并抑制肿瘤增殖。

可以通过以下方式来实现免疫检查点抑制：针对T细胞，通过阻断受体如CTLA-4和PD-1；或着针对癌细胞，通过阻断蛋白如PD-L1和PD-L2。PD-1和PD-L1是癌症免疫疗法的靶标，例如，因为它们相互作用的阻断会中止或限制T细胞应答，并导致抗癌免疫活性的重新激活，进而导致肿瘤消退。已开发出几种靶向免疫检查点调节剂的单克隆抗体、肽、蛋白质和其他小分子，例如靶向PD-1的帕博利珠单抗(pembrolizumab)和纳武利尤单抗(novilumab)以及靶向PD-L1的阿替利珠单抗(atezolizumab)、阿维鲁单抗(avelumab)和度伐利尤单抗(durvalumab)。但是，最近发表的此类免疫检查点抑制剂(ICI)分子的临床结果显示出不良的临床疗效，其中多个队列报告的应答率较低。

需要使用ICI进行癌症免疫疗法的新的组合物和方法。

发明内容

在一方面，纳米颗粒系统包括多价纳米颗粒核心，其包含与之缀合的多个免疫检查点抑制剂。

在另一方面，药物组合物包含所述纳米颗粒系统和药学上可接受的赋形剂。

在另一方面，一种制备纳米颗粒系统的方法包括，在足以将多个免疫检查点抑制剂缀合至多价纳米颗粒核心并提供纳米颗粒系统的条件下，使包含多个反应性端基的多价纳米颗粒核心与包含一种或多种免疫检查点抑制剂的组合物接触。

在另一方面，免疫疗法方法包括将所述纳米颗粒系统施用于有需要的受试者。

附图说明

图1是描述通过树枝状聚合物介导的多价结合效应增强癌症免疫疗法的假设的示意图。G7-aPD-L1缀合物和靶标受体(PD-L1)之间增强的结合动力学导致改善了PD-1/PD-L1相互作用的抑制，从而提高了免疫疗法的功效。

图2说明了第7代(G7)聚(氨基胺)(PAMAM)树枝状聚合物和抗PD-L1抗体缀合物(G7-aPD-L1)的合成。用Alexa647标记G7 PAMAM树枝状聚合物，然后使用乙酸酐进行部分乙酰化。然后将剩余的胺端基用琥珀酸酐羧化。使用EDC/NHS(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺)化学方法激活树枝状聚合物上的羧基端基，并以1:5的摩尔比与aPD-L1抗体缀合。最终的缀合物用100k离心过滤器过滤(三次，每次10分钟)。使用BCA试验测量每个树枝状聚合物分子缀合的抗体的数目。每个树枝状聚合物缀合约3.9±0.6个抗体。

图3示出了使用原子力显微镜(AFM)表征树枝状聚合物缀合物，证实了G7树枝状聚合物与抗体之间的成功缀合。AFM图像表明，与游离抗体(D＝12.7±4.4nm；p0.001)和G7 PAMAM树枝状聚合物(D＝16.3±7.3nm；p0.001)相比，G7-Ab缀合物的侧向直径(D)和高度(h)均显著增加。

图4示出了图3的AFM表征的量化。