[发明专利]杂交胸腺、制备方法及诱导异种移植物耐受性、恢复免疫能力和胸腺功能的使用方法

说明书

本公开涉及制备杂交猪‑人胸腺组织以及使用所述杂交胸腺组织在异种移植中诱导耐受性。所述杂交胸腺组织还可用于恢复或诱导受体的免疫能力，以及恢复或促进T细胞祖细胞在受体中发育成成熟功能性T细胞的胸腺依赖性能力。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年9月20日提交的美国专利申请序列号62/734,019的优先权，所述申请在此以引用的方式整体并入。

政府利益声明

本发明是根据美国国家卫生研究院授予的AI084903、AI045897和AI106697在政府资助下进行的。政府对本发明具有一定权利。

技术领域

本公开涉及制备猪-人杂交胸腺及使用所述杂交胸腺在异种移植中诱导耐受性。

背景技术

目前，同种异体供体的严重短缺限制了进行器官移植的数量。可通过使用来自其他物种的器官(异种移植物)来纠正此供需差距。鉴于与使用非人灵长类动物相关的伦理问题和不切实际，猪被认为是最适合人的供体物种。除了与人的器官大小和生理相似性之外，猪快速繁殖和近亲繁殖的能力使它们特别适合进行能够提高其作为人移植供体的能力的遗传修饰。Sachs,Path.Biol.42:217-219,1994；Piedrahita等人,Am.J.Transplant,4增刊6:43-50,2004。

尽管有最新进展，但对异种移植物的免疫反应仍然很强，限制了它们的临床应用。虽然移植与非特异性免疫抑制疗法结合存在高的早期移植物耐受性，但临床器官移植成功的主要限制因素是晚期移植物丢失，这主要是由于移植物的慢性排斥。此外，免疫抑制疗法通常带有不良副作用或增加感染风险。因此，控制对异种移植物的免疫反应的方法将大大提高其适用性。

缺乏Gal基因的基因工程猪避免了由于抗Galα1-3Gal(Gal)天然抗体而在非人灵长类动物中的常见排斥。Cooper D.A brief history of cross-species organtransplantation.Proc(Bayl Univ Med Cent).2012年1月；25(1):49–57。尽管取得了此进步，但T细胞依赖性抗体仍可识别引起排斥的其他猪特异性。Yang YG,SykesM.Xenotransplantation:current status and a perspective on the future.Nat RevImmunol.2007年7月；7(7):519-31。在非人灵长类动物中，T细胞抑制延长猪异种移植物的存活时间，但此类治疗具有很高的毒性。Yamada K,Sykes M,Sachs DH.Tolerance inxenotransplantation.Curr Opin Organ Transplant.2017年12月；22(6):522-528。

T细胞抑制的替代方法是诱导耐受性。异种移植物耐受性方法包括混合嵌合(mixed chimerism)诱导和猪胸腺移植。

混合嵌合可在受体中T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞水平上诱导对供体的耐受性。Griesemer A.,Yamada K.和Sykes M.,Xenotransplantation:Immunological hurdlesand progress toward tolerance,Immunol.Rev.2014；258(1):241–258。Sachs D.H.,Kawai T.和Sykes M.,Cold Spring Harb.Perspect.Med.2014；4:a015529。