[发明专利]治疗非综合征性感觉神经性听力损失的方法

权利要求书

1.一种组合物，所述组合物包含至少两种不同核酸载体，其中：

所述至少两种不同载体中的每一者包含编码硬纤毛蛋白的不同部分的编码序列，所编码部分中的每一者的长度是至少30个氨基酸残基，其中所编码部分中的每一者的氨基酸序列可任选地与所编码部分中的不同者的氨基酸序列部分重叠；

所述至少两种不同载体中没有单一载体编码全长硬纤毛蛋白；

所述编码序列中的至少一者包含跨越硬纤毛蛋白基因组DNA的两个连续外显子的核苷酸序列，并且缺乏所述两个连续外显子之间的内含子序列；并且

当引入哺乳动物细胞中时，所述至少两种不同载体经受彼此同源性重组，由此形成编码全长硬纤毛蛋白的重组核酸。

2.如权利要求1所述的组合物，其中所述至少两种不同载体中的每一者是质粒、转座子、粘粒、人工染色体或病毒载体。

3.如权利要求1所述的组合物，其中所述至少两种不同载体中的每一者是人类人工染色体(HAC)、酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)、或P1源性人工染色体(PAC)。

4.如权利要求1所述的组合物，其中所述至少两种不同载体中的每一者是选自腺相关病毒(AAV)载体、腺病毒载体、慢病毒载体或逆转录病毒载体的病毒载体。

5.如权利要求4所述的组合物，其中所述病毒载体是AAV载体。

6.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所编码部分中没有一者的氨基酸序列与所编码部分中的不同者的氨基酸序列重叠。

7.如权利要求7所述的组合物，其中所编码部分中的每一者的氨基酸序列与所编码部分中的不同者的氨基酸序列部分重叠。

8.如权利要求7所述的组合物，其中重叠氨基酸序列的长度在约30个氨基酸残基至约1000个氨基酸残基之间。

9.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所述载体包括两种不同载体，其中每一者包含内含子的不同区段，其中所述内含子包含存在于硬纤毛蛋白基因组DNA中的内含子的核苷酸序列，并且其中两个不同区段在序列方面重叠至少100个核苷酸。

10.如权利要求9所述的组合物，其中两个不同区段在序列方面重叠约100个核苷酸至约800个核苷酸。

11.如权利要求1-10中任一项所述的组合物，其中所述至少两种不同载体中的每一者的核苷酸序列的长度在约500个核苷酸至约10,000个核苷酸之间。

12.如权利要求11所述的组合物，其中所述至少两种不同载体中的每一者的核苷酸序列的长度在500个核苷酸至5,000个核苷酸之间。

13.如权利要求1-12中任一项所述的组合物，其中所述组合物中不同载体的种数是两种。

14.如权利要求13所述的组合物，其中所述两种不同载体中的第一载体包含编码所述硬纤毛蛋白的N末端部分的编码序列。

15.如权利要求14所述的组合物，其中所述硬纤毛蛋白的所述N末端部分的长度在30个氨基酸至1600个氨基酸之间。

16.如权利要求15所述的组合物，其中所述硬纤毛蛋白的所述N末端部分的长度在200个氨基酸至1500个氨基酸之间。

17.如权利要求14-16中任一项所述的组合物，其中所述第一载体还包含启动子和Kozak序列中的一者或两者。