[发明专利]新颖的杀昆虫毒素受体和使用方法

说明书

本披露涉及杀昆虫毒素抗性管理和新颖的杀昆虫毒素的筛选。一个实施例涉及与编码新颖的杀昆虫毒素受体的多核苷酸和由其编码的多肽有关的分离、表征、组合物和使用方法。所述多核苷酸和多肽可用于鉴定或设计包括新颖的杀昆虫毒素的新颖的杀昆虫毒素受体配体。

以电子方式递交的序列表的引用

该序列表的官方副本经由EFS-Web作为ASCII格式的序列表以电子方式提交，文件名为“7793_Sequence_Listing.txt”，创建于2018年8月10日，且具有2,531千字节大小，并与本说明书同时提交。包含在所述ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且通过引用以其整体并入本文。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年8月13日提交的美国临时申请号62/718,232的权益，该申请以其全文通过引用并入本文中。

技术领域

本披露涉及杀昆虫毒素抗性管理和新颖的杀昆虫毒素的筛选。一个实施例涉及与编码新颖的杀昆虫毒素受体的多核苷酸和由其编码的多肽有关的分离、表征、组合物和使用方法。所述多核苷酸和多肽可用于鉴定或设计包括新颖的杀昆虫毒素的新颖的杀昆虫毒素受体配体。

背景技术

昆虫有害生物是全世界农作物损失中的一个主要因素。例如，黏虫摄食、黑切根虫损害或欧洲玉米螟损害对农业生产者来说在经济上可能是破坏性的。仅来自在田间和甜玉米上的攻击的昆虫有害生物相关的作物损失每年在损失和控制费用方面已经达到约十亿美元。

传统上，种植者已经使用化学杀有害生物剂作为控制农业重要有害生物的手段。引入携带来自苏云金芽孢杆菌的δ-内毒素(Bt)的转基因植物提供了非化学的控制方法。

传统上，Bt毒素通过其对特定昆虫类别的特定毒性来分类。

鳞翅目昆虫对整个北美和世界的玉蜀黍作物造成相当大的损害。主要的有害生物之一是欧洲玉米螟(Ostrinia nubulalis)，通常称为欧洲玉米蛀虫(ECB)。编码来自Bt的晶体蛋白CrylAb和CrylAc的基因已经作为ECB控制和其他有害生物控制的手段被引入玉蜀黍中。这些转基因玉蜀黍杂合体已经有效地控制了ECB。然而，所形成的对Bt毒素的抗性对有害生物的控制提出了挑战。

鉴定Bt毒素的植物有害生物结合多肽可用于调研Bt毒素-Bt毒素受体相互作用、选择和设计改进的毒素或其他杀昆虫剂、开发新颖的杀昆虫剂、以及筛选抗性或其他抗性管理策略和工具。

发明内容

提供了用于调节细胞对毒素的易感性的组合物和方法。组合物包括来自鳞翅目昆虫玉米穗蛾(CEW，玉米穗虫(Helicoverpa zea))和欧洲玉米蛀虫(ECB，欧洲玉米螟(Ostrinia nubilalis))、秋夜蛾(FAW，草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda))、粉纹夜蛾(cabbage looper，Trichoplusia ni)、黑切根虫(小地老虎(Agrotis ipsilon))和大豆夜蛾(soybean looper)(SBL，大豆尺蠖(Chrysodeixis includens))和鞘翅目昆虫西方玉米根虫(玉米根萤叶甲(Diabrotica virgifera virgifera))和南美叶甲(Diabroticaspeciosa)的毒素受体多肽及其片段和变体。还提供了编码多肽的核酸，对多肽具有特异性的抗体，以及用于在目的细胞中表达多肽的核酸构建体。

在此提供的方法可用于调研毒素受体的结构-功能关系；调研毒素-受体相互作用；阐明毒素的作用方式；筛选和鉴定包含新颖的杀昆虫毒素的新颖的毒素受体配体；设计并开发新颖的毒素受体配体；并产生对杀昆虫毒素具有改变的易感性的昆虫或昆虫群落。