[发明专利]富马酸还原酶过表达导致酵母中增加的发酵速率

权利要求书

1.一种用于增加生长于碳水化合物底物上的酵母细胞的乙醇生产速率的方法，所述方法包括：在亲本酵母细胞中引入遗传改变，所述遗传改变引起所述经修饰的细胞与亲本细胞相比产生增加量的富马酸还原酶，其中在等同发酵条件下，所述经修饰的细胞与亲本细胞的发酵速率相比，发酵速率增加。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述遗传改变包括将核酸引入亲本细胞中，所述核酸能够指导富马酸还原酶以高于等同条件下生长的亲本细胞的水平表达。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述遗传改变包括引入用于表达富马酸还原酶的表达盒。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述富马酸还原酶是长的或短的形式。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述富马酸还原酶是短的形式。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在进入发酵24小时时测量乙醇生产。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述乙醇生产的速率增加不是因为木糖的代谢。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述碳水化合物底物基本上不含木糖。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞进一步包含磷酸转酮酶途径的一个或多个基因。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述磷酸转酮酶途径的基因选自由以下组成的组：磷酸转酮酶、磷酸转乙酰酶、和乙酰化乙酰基脱氢酶。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中基于OSM1mRNA表达，富马酸还原酶表达的增加量是等同条件下生长的亲本细胞的表达水平的约80倍。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞进一步包含编码碳水化合物加工酶的外源基因。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞进一步包含在甘油途径和/或乙酰辅酶A途径中的改变。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞进一步包含用于制备乙醇的替代性途径。

15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞属于酵母菌属(Saccharomyces spp)物种。