[发明专利]从条件性重编程细胞获得动物模型的方法以及该动物模型用于筛选抗肿瘤药物的用途

权利要求书

1.一种获得用于筛选抗肿瘤药物的动物模型的方法，包括：

(1)在组合物中培养从患者的肿瘤活检样本获得的原代肿瘤细胞，所述组合物包含：

a)0.01-1.0mg/L氢化可的松；

b)1.0-10.0mg/L菊粉；

c)1.0-20.0μg/L霍乱毒素；

d)2.0-50.0mg/L腺嘌呤；

e)1.0-30.0μg/L EGF；

f)1.0-30.0μmol/L Y-27632；

g)青霉素/链霉素；

h)2-20％FBS；

i)F12培养基；

j)高糖DMEM，以及可选地

k)非必需氨基酸溶液；

l)GlutaMAX补充剂；

(2)将步骤(1)中获得的原代肿瘤细胞植入到动物中。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中的所述组合物包含：

a)0.3-0.5mg/L，优选0.4mg/L氢化可的松；

b)4-6mg/L，优选5mg/L菊粉；

c)7-9μg/L，优选8.3μg/L霍乱毒素；

d)20-30mg/L，优选24.2mg/L腺嘌呤；

e)8-12μg/L，优选10μg/L EGF；

f)8-12μmol/L，优选10μmol/L Y-27632；

g)青霉素/链霉素；

h)8-12％，优选10％FBS；

i)F12培养基；

j)高糖DMEM，以及可选地

k)非必需氨基酸溶液；

l)GlutaMAX补充剂。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述肿瘤活检样本是穿刺活检样本。

4.根据权利要求1所述的方法，其中从穿刺活检中获得的所述样本中的所述原代肿瘤细胞的浓度小于约2mol/L、小于约1.9mol/L、小于约1.8mol/L、小于约1.7mol/L、小于约1.6mol/L、小于约1.5mol/L、小于约1.4mol/L、小于约1.3mol/L、小于约1.2mol/L、小于约1.1mol/L、小于约1.0mol/L、小于约0.9mol/L、小于约0.8mol/L、小于约0.7mol/L、小于约0.6mol/L、小于约0.5mol/L、小于约0.4mol/L、小于约0.3mol/L、小于约0.2mol/L、小于约0.1mol/L，例如小于约2mol/L、小于约1.7mol/L、小于约0.8mol/L、小于约0.64mol/L、小于约0.59mol/L。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物是小鼠或大鼠，尤其是免疫缺陷小鼠。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述原代肿瘤细胞在步骤(1)的所述组合物中与滋养层细胞一起进行培养，尤其地，所述滋养层细胞是小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)，更具体而言，所述MEF细胞已经用丝裂霉素C处理过。

7.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中获得的所述原代肿瘤细胞在中空纤维中被植入所述动物中，尤其地，所述中空纤维由改良聚偏氟乙烯制成，更具体而言，所述中空纤维由改良聚偏氟乙烯制成，并且可截留分子量为500000道尔顿。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述中空纤维被皮下植入所述动物中。

9.一种通过根据权利要求1至8中任一项所述的方法获得的用于筛选抗肿瘤药物的动物模型，其中所述动物是小鼠或大鼠，尤其是免疫缺陷小鼠。

10.一种用于筛选抗肿瘤药物的方法，包括向根据权利要求9所述的动物模型施用候选药物。

11.根据权利要求10所述的方法，还包括在根据权利要求9所述的动物模型中测量肿瘤细胞生长。

12.根据权利要求9所述的动物模型在筛选抗肿瘤药物中的用途。