[发明专利]直接免疫组织化学和免疫细胞化学方法

权利要求书

1.用于检测样品中多个目标表位的方法，所述方法包括：

(a)第一抗体结合步骤，包括在适合于形成包含第一目标表位和第一聚合的酶/抗体缀合物的第一复合物的条件下，使所述样品与包含多个第一酶分子和识别所述第一目标表位的第一抗体的所述第一聚合的酶/抗体缀合物接触；

(b)第二抗体结合步骤，包括在适合于形成包含第二目标表位和第二聚合的酶/抗体缀合物的第二复合物的条件下，使所述样品与包含多个第二酶分子和识别所述第二目标表位的第二抗体的所述第二聚合的酶/抗体缀合物接触；

(c)第一抗体去除步骤，包括从所述样品基本上去除不形成所述第一复合物的所述第一聚合的酶/抗体缀合物；

(d)第二抗体去除步骤，包括从所述样品基本上去除不形成所述第二复合物的所述第二聚合的酶/抗体缀合物；

(e)第一酶底物接触步骤，包括使所述样品与用于所述第一酶分子的第一酶底物组合物接触；以及

(f)第二酶底物接触步骤，包括使所述样品与用于所述第二酶分子的第二酶底物组合物接触，

从而允许检测所述样品中的所述多个目标表位。

2.权利要求1所述的方法，其中所述第一酶分子和所述第二酶分子是不同的。

3.权利要求2所述的方法，其中所述第一抗体结合步骤和所述第二抗体结合步骤同时地执行。

4.权利要求2或3所述的方法，其中所述第一抗体去除步骤和所述第二抗体去除步骤同时地执行。

5.权利要求2-4中任一项所述的方法，其中所述第一酶底物接触步骤和所述第二酶底物接触步骤同时地执行。

6.权利要求2-4中任一项所述的方法，其中所述第一酶底物接触步骤在所述第二酶底物接触步骤之前执行。

7.权利要求2-4中任一项所述的方法，其中所述第一酶底物接触步骤在所述第二酶底物接触步骤之后执行。

8.权利要求2所述的方法，其中所述第一抗体结合步骤在所述第二抗体结合步骤之前执行。

9.权利要求8所述的方法，其中所述第一抗体去除步骤和所述第一酶底物接触步骤在所述第二抗体结合步骤之前执行。

10.权利要求9所述的方法，进一步包括第一抗体剥离步骤，所述第一抗体剥离步骤包括从所述第一目标表位解离所述第一抗体，其中所述第一抗体剥离步骤在所述第二抗体结合步骤之前执行。

11.权利要求9所述的方法，进一步包括第一酶灭活步骤，所述第一酶灭活步骤包括灭活所述第一酶分子，其中所述第一酶灭活步骤在所述第二抗体结合步骤之前执行。

12.权利要求2所述的方法，其中所述第一抗体结合步骤在所述第二抗体结合步骤之后执行。

13.权利要求12所述的方法，其中所述第二抗体去除步骤和所述第二酶底物接触步骤在所述第一抗体结合步骤之前执行。

14.权利要求13所述的方法，进一步包括第二抗体剥离步骤，所述第二抗体剥离步骤包括从所述第二目标表位解离所述第二抗体，其中所述第二抗体剥离步骤在所述第一抗体结合步骤之前执行。

15.权利要求13所述的方法，进一步包括第二酶灭活步骤，所述第二酶灭活步骤包括灭活所述第二酶分子，其中所述第二酶灭活步骤在所述第一抗体结合步骤之前执行。

16.权利要求1所述的方法，其中所述第一酶分子和所述第二酶分子是相同的。

17.权利要求16所述的方法，其中所述第一抗体结合步骤在所述第二抗体结合步骤之前执行。