[发明专利]一种灵芝孢子的保存和激活方法

权利要求书

1.一种灵芝孢子的保存和激活方法,其特征在于，包括以下步骤：

a.取刚刚从灵芝子实体收集到的孢子，立即浸泡于液氮中10-30秒，然后取出，再浸泡于-40～-20℃的去活液中120-220秒，得去活孢子；

b.取去活孢子加入与去活液相同温度的改良液体石蜡中进行密封，得封存体，然后将封存体置于保存温度为2-10℃的冰箱中即可保存3-5年；

c.取步骤b中保存于冰箱中的封存体，开封后从改良液体石蜡中取出去活孢子，然后用滤纸吸干表面的改良液体石蜡，置于功率密度为1-9mW/cm²的微波下照射6-12分钟，照射期间的温度与步骤b中冰箱的保存温度相同，得初级活化孢子；

d.取初级活化孢子，喷洒活化液后在10-20℃下静置活化10-30分钟，得终极活化孢子；所述终极活化孢子无需消毒便可直接用于接种培养。

2.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子的保存和激活方法，其特征在于，步骤a中所述去活液包括以下重量份比的原料：鱼腥藻15-25份、三角褐指藻13-27份、羊栖菜1-5份、海带4-8份、纤维素酶0.07-0.13份、蛋白酶0.02-0.06份、褐藻酸钠裂解酶0.01-0.03份、新鲜芦荟16-26份、鸢尾黄素0.15-0.75份。

3.根据权利要求2所述的一种灵芝孢子的保存和激活方法，其特征在于，所述去活液的制备方法为：取鱼腥藻、三角褐指藻、海带、羊栖菜、海带，加入纤维素酶、褐藻酸钠裂解酶酶解100-200分钟，得酶解物，备用；取新鲜芦荟，去掉叶肉，捣碎后，按料液比1:15-25加入氢氧化钠水溶液，超声处理45-65分钟，然后过滤，收集滤液，接着加入滤液等体积的石油醚萃取2-4次，收集下层水层，加入酶解物，搅拌均匀，随后调节pH值至中性，过滤后加入鸢尾黄素，再经过0.22μm的滤膜过滤除菌，得去活液。

4.根据权利要求3所述的一种灵芝孢子的保存和激活方法，其特征在于，所述氢氧化钠水溶液的质量浓度为0.05％-0.13％。

5.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子的保存和激活方法，其特征在于，步骤b中所述改良液体石蜡的制备方法为：按重量份比，取1-乙基-3-胍基硫脲盐酸盐20-30份，加入乙醇水溶液45-65份溶解后，再加入乙二酸4-10份和乙酰丙酸3-11份，加热回流8-18小时得反应液，然后取反应液回收乙醇至无醇味，接着加入正己烷20-40份进行萃取，收集萃取后的正己烷得萃取液，然后萃取液经减压蒸发除去正己烷，得离子液体；在得到的离子液体中加入离子液体重量10-20倍的液体石蜡、1-5倍的玉米朊，混合均匀，得改良液体石蜡。

6.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子的保存和激活方法，其特征在于，步骤d中所述活化液包括以下重量份比的原料：磷酸盐缓冲液70-130份、桑叶4-16份、橙皮3-9份、竹叶1-5份、西瓜皮1-5份、叶绿素0.1-0.5份、碧萝芷2-7份、甘露低聚糖1-3份、青蒿素0.01-0.05份、春雷霉素0.01-0.05份和甘油20-50份。

7.根据权利要求6所述的一种灵芝孢子的保存和激活方法，其特征在于，所述活化液的制备方法为：取桑叶、橙皮、竹叶和西瓜皮，洗净晾干，粉碎后加磷酸盐缓冲液浸泡40-60分钟，然后在55-65℃下回流提取75-95分钟后，过滤，收集滤液，得植物提取液，备用；取叶绿素、碧萝芷、甘露低聚糖，混合均匀，然后加入20％-30％重量的甘油，置于高压均质机中进行均质，接着加入青蒿素、春雷霉素和剩余的甘油，搅拌均匀，得均质包合物，将均质包合物加入到所述植物提取液中，搅拌均匀，再经过0.22μm的滤膜过滤除菌，得活化液；所述均质包合物与植物提取液的重量比为1：6-16。