[发明专利]一种防参止痒颗粒的指纹图谱测定方法

权利要求书

1.一种防参止痒颗粒指纹图谱的测定方法，所述方法，步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：取防参止痒颗粒粉碎，加入甲醇，超声提取，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的右旋薄荷酮、人参炔醇、苦参碱、苍术素、牛蒡甙、齐墩果酸、常春藤皂苷元、阿魏酸、知母皂苷、地黄苷、甘草酸铵、亚麻苦甙对照品，分别加入甲醇制成对照品溶液；

(3)测定：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，记录色谱图；

(4)根据色谱图和标准对照指纹图谱进行对照，符合一致为合格品。

2.根据权利要求1所述的测定方法，步骤如下：

1)供试品溶液的制备：取待检测防参止痒颗粒0.5g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称重，超声(700W，50kHz)处理30min，放冷，用甲醇补足减失的重量，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，作为供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：分别取右旋薄荷酮、人参炔醇、苦参碱、苍术素、牛蒡甙、齐墩果酸、常春藤皂苷元、阿魏酸、知母皂苷、地黄苷、甘草酸铵、亚麻苦甙对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度分别为27.3、83.3、93.5、33.7、87.4、27.6、35.6、19.8、29.1、17.5、25.2、19.6μg/mL的混合对照品溶液；

3)将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据供试品溶液色谱图采用计算机模拟技术，根据同一性原则和标准对照指纹图谱进行比对，如果90％以上拟合，则为合格品；

其中，高效液相色谱的色谱条件如下：

采用PHENOMENEX LUNA C-18色谱柱；流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸水溶液(体积分数)；梯度洗脱：

0-25min，流动相A5％-22％，流动相B 95％-78％；

25-38min，流动相A22％-46％，流动相B 78％-54％；

38-54min，流动相A46％-55％，流动相B 54％-45％；

54-76min，流动相A55％-75％，流动相B 45％-25％；

76-90min，流动相A75％-85％，流动相B 25％-15％；

流动相流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为：0～48min，220nm；48～68min，254nm；68～90min，330nm。进样量：10μL。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其中，所述标准对照指纹图谱建立方法如下：

1)取多批次检测合格的防参止痒颗粒约0.5g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称重，超声(700W，50kHz)处理30min，放冷，用甲醇补足减失的重量，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，作为供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：

分别取右旋薄荷酮、人参炔醇、苦参碱、苍术素、牛蒡甙、齐墩果酸、常春藤皂苷元、阿魏酸、知母皂苷、地黄苷、甘草酸铵、亚麻苦甙对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度分别为27.3、83.3、93.5、33.7、87.4、27.6、35.6、19.8、29.1、17.5、25.2、19.6μg/mL的混合对照品溶液；

3)将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据多批次供试品溶液色谱图采用计算机模拟技术，根据同一性原则绘制标准对照指纹图谱，得到标准对照指纹图谱；其中，高效液相色谱的色谱条件如下：

采用PHENOMENEX LUNA C-18色谱柱；流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸水溶液(体积分数)；梯度洗脱：

0-25min，流动相A5％-22％，流动相B 95％-78％；

25-38min，流动相A22％-46％，流动相B 78％-54％；

38-54min，流动相A46％-55％，流动相B 54％-45％；

54-76min，流动相A55％-75％，流动相B 45％-25％；

76-90min，流动相A75％-85％，流动相B 25％-15％；

流动相流速为1.0ml/min；柱温为30℃；检测波长为：0～48min，220nm；48～68min，254nm；68～90min，330nm。进样量：10μL。